复合酶解制备海蜇多肽抗氧化活性的研究【毕业论文】

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1、本科毕业论文(20届)复合酶解制备海蜇多肽抗氧化活性的研究专业:药学目录摘 要1Abstract21前言32材料与试剂42.1材料42.2试剂42.3主要设备与仪器43试验方法43.1海蜇活性肽的制备43.1.1样品预处理43.1.2制备海蜇活性肽53.2分离、纯化海蜇抗氧化活性肽53.2.1酶解液的活性分离(超滤)53.2.2SephadexG-15凝胶层析53.3抗氧化实验53.3.1DPPH自由基清除能力的检测53.3.2还原力的检测53.3.3清除羟自由基能力的测定64试验结果与讨论64.1

2、分离纯化64.2海蜇初酶解液的抗氧化活性测定64.3海蜇复合酶解液的抗氧化活性测定85小结9参考文献10致谢13附录Ⅰ英文翻译14附录Ⅱ英文原文19【摘要】目的:研究复合酶解海蜇中海蜇多肽的抗氧化活性。方法:海蜇经碱性蛋白酶初酶解、胰蛋白酶二次酶解后得复合酶解液,将酶解液离心,收集上清液得海蜇活性肽粗品。粗品经超滤、SephadexG-15凝胶层析、冷冻干燥纯化得海蜇抗氧化活性肽,利用DPPH法、清除羟自由基法和还原力测定法进行抗氧化实验。结果:测得<3K时的抗氧化能力最强。结论:海蜇多肽具有一定的

3、体外抗氧化能力。海蜇是一类潜在的海洋生物天然抗氧化剂,从而为海蜇多肽的进一步开发利用提供依据。【关键词】海蜇;多肽;复合酶解;抗氧化活性StudyonAntioxidantactivityofthepeptidePurifiedFromjellyfishbycompositeenzymatichydrolysis[Abstract]Objective:Researchantioxidantactivityofthepeptidepurifiedfromjellyfishbycompositeenzy

4、matichydrolysis.Methods:Jellyfishbythealkalineproteaseenzymeinearly、trypsindigestioninsecondtogetcompoundhydrolyzate.Centrifugethehydrolyzate,Jellyfishsupernatantwasthecrudepeptides,crudeproductbyultrafiltration、SephadexG-15gelchromatography、purifiedby

5、freeze-dryingtogetantioxidantactivityofjellyfishpeptide.UsingDPPHmethod,scavengingsuperoxideanionradicallawandtheabilitytoassayforanti-oxidationexperiment.Results:Measuredwhen<3Kisthestrongestantioxidantcapacity.Conclusion:Jellyfishhasacertainpeptidein

6、vitroantioxidantcapacity.Jellyfishareaclassofpotentialmarinenaturalantioxidants.Jellyfishpeptidessoastoprovidethebasisforfurtherdevelopmentandutilization.[Keywords]Jellyfish;Polypeptide;Compoundenzyme;Antioxidantactivity1前言生物活性肽(biologicallyactivepepti

7、des)[1-3]是指那些具有特殊生理活性的肽类,是世界上药物及保健品研究的热点,目前通过蛋白酶解[4-7]生产的活性肽主要来源于陆地的蛋白源,如牛乳酯蛋白、大豆蛋白、玉米醇溶蛋白等。海洋生物为了适应高盐、高压、低温、缺氧等极端的海洋生境,其蛋白质的氨基酸组成或序列都与陆地生物蛋白有很大的不同,在种类和数量上也远远超过陆地蛋白资源[8-9]。近年来对海洋生物活性肽,特别是抗肿瘤活性肽的研究取得了很大进展。人们现如今所提取的抗肿瘤蛋白主要有从海鞘、海绵、软体动物[10]、珊瑚中提取的环行多肽,从贝类、

8、海参、乌贼墨等中提取的糖蛋白,还有从海藻、鲎、鲨鱼软骨中提取的多肽[11]。但是由于海洋资源的开发利用较晚,海洋活性肽尚未形成规模产业,因此,借鉴陆地活性肽开发的酶工程技术,以海洋生物蛋白资源为原料,通过对酶解、制备等工艺的综合研究,即可研制出陆地蛋白源和化学合成所无法生产的系列天然、高效、新颖的生物活性肽[12]。随着生存环境的恶化以及社会压力的加大使现代人的健康受到严重的威胁,自由基[13-14]引起机体损伤变性,导致机体各种疾病产生,已经引起人们强烈的重视。低价

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