吸光光度法(1)ok.ppt

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1、AbsorptionPhotometrySpectrophotometry吸光光度法简介7.1.1光的基本性质吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择吸收的特性而建立的分析方法，又称分光光度法，简称光度法。光的电磁波性质射线x射线紫外光红外光微波无线电波10-2nm10nm102nm104nm0.1cm10cm103cm105cm可见光单色光、复合光、光的互补单色光复合光光的互补单一波长的光由不同波长的光组合而成的光若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光－互补色光。蓝黄紫绿青蓝橙红青7.1.2物质对光的吸收物质的颜色与光的关系完全吸收完全透过吸收黄色光光谱示意表观现象示意复

2、合光物质吸收了可见光而显示出特征的颜色，该过程与物质的性质及光的性质有关。吸收光谱的获得AbsorptionSpectra(Spectrum)表征某物质对不同波长单色光的吸收程度。以波长（）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，即吸光度随波长变化的曲线，即为吸收光谱。吸光光度法定性与定量分析的基础定性分析基础定量分析基础物质对光的选择吸收ABA在一定实验条件下，物质对光的吸收与物质的浓度成正比。AC增大7.1.3溶液的吸光定律若入射光强为I0，则Io＝Ｉa+It+Ir忽略反射光：I0=Ia+It透光率（透射比）Transmittance（常用百分数表示）0.0%~100.0%全部吸收T=0.

3、0%全部透射T=100.0%入射光I0透射光ItT越大，说明对光的吸收越弱；相反，T越小，对光的吸收越强一、光吸收的基本定律吸收定律-------朗伯-比尔定律Lambert–BeerLawI0dbbItII-dI得定义——溶液对单色光的吸收程度为吸光度AAbsorbance1、吸光度与透光率AbsorbanceandtransmittanceT=0.0%A=∞T=100.0%A=0.0A=0.434T=36.8%I0dbbItII-dIT：透光率A：吸光度1.00.50ACA100500T%T2、朗伯-比尔定律的前提条件（1）入射光为单色光（2）吸收发生在均匀介质中（无散射）（3）吸光质点

4、间无相互作用3、吸光系数Absorptivityb：吸光液层的厚度，光程pathlenth，cmc：吸光物质的浓度，g/L,mol/LK：比例常数入射光波长物质的性质温度取值与浓度的单位相关吸收系数，L·g–1·cm-1摩尔吸光系数，L·mol–1·cm-1c：mol/LKc：g/LKac：g/100mLK比吸收系数MolarAbsorptivityAbsorptivity（1）摩尔吸光系数ε它表示:L·g–1·cm-1吸光物质浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时溶液对某单色光的吸光度。是物质吸收能力的量度。A=εbCAC0①ε是对吸光物质而言，是由吸光物质的结构特征，吸光面积等

5、因素决定，可作为定性分析的参考。②ε与入射光波长有关，应用下标注明：εmax③ε还可用来衡量灵敏度例，分光光度法测铜铜试剂法测Cu426=1.28104L．mol-1．cm-1双硫腙法测Cu495=1.58105L．mol-1．cm-1一般情况<104：104~105>105低灵敏度中等灵敏度高灵敏度A=εbC（2）吸收系数a，L·g–1·cm-1二者关系：＝MaM：吸光物质的摩尔质量波长一定时，溶液浓度为1％（g/100mL）光程为1cm的吸光度相互关系（3）比吸光系数（百分吸光系数）4、桑德尔灵敏度S，SandellS：表示光程为1cm吸收池测得吸光度为0.001时，每m

6、L溶液中待测物质的微克数。单位为g．cm-2。Sandell灵敏度与的关系5、吸收曲线（吸收光谱）AbsorptionSpectra(Spectrum)同一物质，浓度不同，吸收曲线形状和最大吸收波长位置不变。A或吸收定律与吸收光谱的关系AC吸光定律A或吸收光谱ACmax6、吸光度的加合性多组分体系中，如果各组分之间无相互作用，其吸光度具有加合性，即即吸光光度法用于混合组分同时测定的依据二、引起朗伯-比尔定律偏离的因素（一）物理因素1、非单色光引起的偏离（与仪器有关）严格地说，朗伯—比耳定律要求入射光为单色光。而使用的是连续光源，经单色器分光后，用狭缝调节光谱带的宽度，即分光后

7、的出射光仍是一个“复合光”，只是这种光的波长范围很窄而已，所以说，单色光并非是一条几何线。单一波长，固定；不同波长，不同。在实际工作中，入射光通常具有一定的带通。为了避免非单色光带来的影响，一般选用峰值波长进行测定。1对应的1较小2对应的2较大A或12此外，选用峰值波长，也可以得到较高的灵敏度。2、非垂直入射引起的偏离♦在紫外一可见分光光度分析中，由于溶液的不均匀，如被测液为胶