抗肿瘤单链抗体融合蛋白的研究进展.pdf

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1、ISSN1007—8738细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmuno1)2012，28(2221文章编号：1007—8738(2012)02—0221—03抗肿瘤单链抗体融合蛋白的研究进展王旋综述姜晓兵审阅(华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科，湖北武汉430022)[关键词]抗肿瘤；单链抗体融合蛋白；进展源性抗体应用于人体易产生人抗鼠反应(HAMA)，即便是人【中图分类号]R739．41；R392．11[文献标识码】A源化单抗在反复使用后也可能导致抗独特型抗体反应(anti

2、—idiotypicresponse)7j。为了克服大分子IgG的这些缺点，人们尽管有手术、放疗和化疗等综合治疗手段，在过去20多开始研究分子较小的抗体片段。年，恶性脑胶质瘤特别是多形胶质母细胞瘤的预后并无明显单链抗体是近年来备受关注的一种分子较小的基因工程改善。然而，在成人颅内恶性肿瘤中，多形胶质母细胞瘤每抗体。单链抗体(Single-chainantibody)即单链抗体可变区片年的发病率占到50％以上⋯。虽然常规手术配合放化疗可以段(Single—chainantibodyvariablef

3、ragment，orScFv)由抗体重延长患者的生命，但是浸润性生长的特性决定了上述方法都链可变区(V)和轻链可变区(V)通过一段连接肽(Linker)无法有效清除肿瘤细胞，导致肿瘤在短时间内复发，患者的连接而成。其相对分子质量(M)为27000—30000，是亲代中位生存期一般不超过15个月。免疫治疗通过激发和补抗体全部抗原结合特异性的最小功能结构单位。scFv基因的充机体的抗肿瘤免疫能力来杀灭肿瘤细胞，具有特异性强、构建最早是从杂交瘤细胞中提取mRNA，通过反转录、cDNA、毒副反应轻和长期记

4、忆等特点，对于靶向清除侵润的残余肿聚合酶链反应(PCR)扩增抗体V和V．基因，用事先设计的瘤细胞是一种较理想的辅助治疗策略。过去认为中枢神经系连接肽将V。的C端与V的N端或V的N端V的C端相统是免疫豁免区，免疫治疗难以奏效，但近年来越来越多的连接构成scFv基因。这种构建方法的前体是有相应的杂交证据提示中枢神经系统并非免疫豁免区，有研究证实被激活瘤。近年来噬菌体表面呈现技术(phagesurfacedisplaytech．的淋巴细胞可以穿过血脑屏障。这使针对胶质瘤的免疫辅nology)的发展和应用

5、解决了这一难题。噬菌体展示(Phase助治疗成为可能。display)是应用最广泛的单链抗体选择方法，其原理是将单链抗体的基因片段插入丝状噬菌体基因组，使之与丝状噬菌体l单链抗体融合蛋白的构建外壳蛋白编码基因相融合，从而将功能性单链抗体表达于噬表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor，EG-菌体颗粒的表面，然后通过固相或液相筛选法进行筛选。固FR)是表皮生长因子基因家族的一员，该家族有四个不同的相筛选法是噬菌体抗体与固相化的抗原一起孵育，表达有靶成员，包括：EG

6、FR(HER-1／ErbB一1)，HER-2／neu(ErbB-2)，抗原单链抗体的噬菌体颗粒就会结合于固相，洗去未结合的HER-3(EthB一3)和HER一4(ErbB一4)。最初认为，EGFR刺游离噬菌体颗粒，将结合于固相的噬菌体解离下来，感染宿激肿瘤形成是通过特异性扩增激活型野生型EGFR(EGFR—主菌进行扩增，然后再重复这一“吸附一洗涤．洗脱．扩增”的wt)达成的。然而，现在许多已知的GBMs研究结果表明扩增富集过程，可以使特异性的噬菌体得到千倍乃至1×10’倍的出的EGFR中存在着突变

7、型J。EGFR的Ⅲ型突变体(EGFRv富集。液相筛选法是将抗原标记生物素后在液相中利用链亲Ⅲ或EGFRⅢ型突变体)表达在40％的原发性胶质母细胞瘤和素磁珠借助磁场的作用进行噬菌体单链抗体筛选，液相筛表面，然而，在神经元、胶质细胞和血管内皮细胞等正常组选法可更好地保持抗原的天然构象，可通过精确调节抗原的织结构中几乎不表达，其特异性较高，因此EGFR是肿瘤浓度筛选到高亲和力的单链抗体。利用噬菌体抗体库技术建治疗中一个很有前景的靶分子。针对肿瘤抗原的免疫治疗有立的抗肿瘤基因文库，可以非常方便的获得针对多

8、种肿瘤的多种方法，目前抗体治疗被证明最为成熟、有效。单克隆抗不同抗原，不同决定簇的功能性抗体片段，通过淘筛(pan—体因其具有与特定抗原专一性结合的特性，自1975年单克隆ning)这一高效筛选富集含抗体的噬菌体，直接获得目的抗抗体杂交瘤技术问世以后，近年来在肿瘤治疗的临床应用中体。更具有意义的是可直接获得人源性抗体，解决了鼠单抗得到迅猛发展。被广泛应用于多种疾病的诊断及治疗。例用于人体的免疫原性问题。如：Cetuximab单抗(商品名爱必妥)和Nimotuzumab单抗(商随着分