菠菜籽中脂肪酸成分的气相色谱-质谱分析

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1、菠菜籽中脂肪酸成分的气相色谱-质谱分析化学与生命科学学院摘要本试验以菠菜籽为原料，采用索氏提取法对菠菜籽中的脂肪酸成分进行了提取。用KOH/CH3OH酯交换法进行甲酯化脂肪酸，利用气相色谱-质谱法对样品中的组成和含量进行了检测。实验结果表明：菠菜籽中含有6种脂肪酸，其中亚油酸含量为85.30％，11-二十碳烯酸甲酯含量为1.08%，反式-9,12-十八碳二烯酸为1.28%，十五烷酸甲酯的含量约为10.99%，十八烷酸甲酯为0.72%，1-环己烷基乙醇含量为1.08%。其中饱和脂肪酸的相对含量为12.34％，不饱和脂肪酸的相对含量大约为87.66％。关键词：菠菜籽；脂肪酸；分离鉴定；气相色谱-

2、质谱联用仪；索氏提取法整体结构1前言2试验材料与方法3分离鉴定4结果与讨论5致谢1前言脂肪酸结构脂肪酸是羧基（-COOH)与脂肪烃基(开链烃)连接而成的一元羧酸。它可以被看作烃的羧酸衍生物(甲酸除外)，通式是R-COON,R代表烃基。脂肪酸按其烃基结构的不同可分为两大类:一类是饱和脂肪酸，因其室温下呈固态，又称固体脂肪酸，如硬脂酸、棕榈酸等;另一类是不饱和脂肪酸，因其室温下呈液态，又称液体脂肪酸[2,3]，如油酸、亚油酸、亚麻酸等。脂肪酸的分类脂肪酸分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸，其中饱和脂肪酸分为短链饱和脂肪酸和中链饱和脂肪酸；不饱和脂肪酸可分为单不饱和脂肪酸（MU-FA）和多不饱和脂肪酸(

3、PUFA)。脂肪酸的作用[1]多不饱和脂肪酸与心血管系统疾病[2]多不饱和脂肪酸与生长发育[3]多不饱和脂肪酸与抗癌[4]多不饱和脂肪酸与免疫调节[5]多不饱和脂肪酸与肥胖[6]多不饱和脂肪酸与抗氧化气相色谱-质谱原理使混合物中各组分在两相间进行分配，其中一相是固定不动的，称为固定相。令一相是携带混合物流过此固定相的流体，称为流动相。当流动相中所含混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用。各组分在性质和结构上有存在差异，与固定相发生作用的大小、强弱也有差异。因此在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按照先后不同的次序从固定相中流出。这种借在两相间分配原理而使混合物中各

4、组分分离的技术，称为色谱法。2试验材料与方法原料与试剂菠菜种子:鞍山农贸市场试剂：无水乙醇、石油醚、甲醇、氢氧化钾、浓硫酸、正己烷、三氯甲烷、碘化钾、冰乙酸。仪器设备电热恒温鼓风干燥箱（南京实验仪器厂）、华西高速中药粉碎机（浙江省永康溪岸五金药具厂）、旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）、索式提取器（沈阳市卫工玻璃计器厂）、离心机(上海安亭科学仪器厂)、气相色谱-质谱联用仪(美国惠普公司)。菠菜籽粉碎处理试验流程图索氏提取器提取KOH-CH3OH甲酯化气相色谱-质谱分析数据处理与记录脂肪酸的甲酯化（FAME）的制备准确称取油脂0.3～0.4g，加入1mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液3mL，60℃水

5、浴30min(至油滴完全消失)，冷却后加入40mL浓硫酸-甲醇(1:7，V/V)溶液，放入恒温振荡摇床中38℃、130r/min酯化12h，用正已烷萃取2次，合并萃取液，用饱和Nacl溶液洗涤多次，无水Na2SO4干燥，离心分层，取上清液FAME备用。脂肪酸甲酯化气相色谱条件：色谱柱：HP-525m×0.20mm×0.33m,弹性石英毛细管柱；进样口温度230℃；程序升温100℃→280℃（保持10min）升温速率为10℃/min.；分流比100：1。进样量0.4L，载气流量1mL/min。脂肪酸甲酯化质谱条件：离子源为电子轰击源；离子源温度为230℃；电离电压为70eV；电子倍增器电压

6、为2012V；发射电流为34.6A；接口温度为230℃；质量范围为m/z20-500。鉴定与分析按上述步骤得出菠菜籽脂肪油的GC-MS总离子流色谱图（图1）所示4.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.0050000001e+071.5e+072e+072.5e+073e+073.5e+074e+074.5e+075e+075.5e+076e+076.5e+077e+07Time-->Abundance213456图1菠菜籽的脂肪酸甲酯化的GC/MS图通过数据处理系统，按峰面积归一化法分析确定的菠菜籽中脂肪酸的相对含量列于

7、表1。所确定的化学成分的质谱图由联用仪的计算机谱图库检索，并分别与EPA/NIH及有关文献对照确定其结果。分析峰号成分保留时间分子式相对含量%相似度1十五烷酸甲酯11.97C15H28O210.999829,12-十八碳二烯酸甲酯13.69C18H32O285.30993十八烷酸甲酯13.87C18H36O20.729941-环己烷基乙醇15.22C8H16O0.6395511-二十碳烯酸15.42C22H3