hplc法测定复方石韦颗粒中苦参碱含量

《hplc法测定复方石韦颗粒中苦参碱含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、HPLC法测定复方石韦颗粒中苦参碱含量【摘要】目的建立HPLC法测定苦参碱含量的方法。方法以反相高效液相法测定苦参碱的含量。色谱柱：HanbonLichrospher(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.1%三氟醋酸（5:95）；检测波长：205nm；结果苦参碱在0.2～1.0μg浓度范围内线性关系良好；（r＝0.9998，n=5）平均加样回收率为100.02%，RSD为1.24%。结论该方法快速，简便，准确，重复性好。【关键词】复方石韦颗粒;苦参碱;HPLC法复方石韦颗粒是《卫生部药品标准中药成方制剂第十五册》收载的片剂剂改品种。由

2、石韦、黄芪、苦参、�蓄四味药组成。复方石韦颗粒具有清热燥湿，利尿通淋。用于小便不利，尿频，尿急，尿痛，下肢浮肿等症。也可用于急慢性肾小球肾炎，肾盂肾炎，膀胱炎，尿道炎[1-2]。苦参碱为其主要成分，因此把苦参碱的含量作为复方石韦颗粒的质控标准。1仪器与试药1.1仪器与试药美国Waters-515型高效液相色谱仪；色谱柱：HanbonLichrospher（250mm×4.6mm，5μm）；检测器：Waters-2487紫外检测器；Empower色谱工作站。1.2苦参碱对照品（中国药品生物制品检定所编号5110805-200306）；复方石韦颗粒（厂家

3、提供）；乙腈均为色谱纯（默克公司），其余试剂均为分析纯。2实验方法与结果2.1色谱条件的选择色谱柱：HanbonLichrospher(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.1%三氟醋酸（5:95）；检测波长：205nm；流速：1.0ml/min；进样体积：10μL；柱温：35℃。该条件下苦参碱与其他组分均能达到基线分离，阴性对照样品在苦参碱色谱峰的保留时间处无干扰，结果见图1。2.2对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品10.04mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取50ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至

4、刻度，摇匀，即得（含苦参碱50.2μg/ml）。2.3供试品溶液的制备取本品，研细，取约1g，精密称定，加浓氨试液1ml使浸润，再精密加氯仿25ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，用氯仿补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。2.4检测波长的选择取苦参碱对照品的甲醇溶液，置紫外分光光度计中，在190～350nm的波长范围内进行光谱扫描，结果苦参碱在2055nm的波长处有最大吸收，故将本品的检测波长定为205nm。2.5线性关系考察分别精密吸取

5、对照品溶液2、4、6、8、10μl进样，记录色谱峰面积，以苦参碱浓精密吸取浓度为100.4μg/ml的苦参碱对照品溶液2、4、6、8、10ml，分别置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取10μl进样，测定其峰面积积分值，以浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为：Ａ＝562878×Ｃ－4448，r＝0.9998。结果表明苦参碱在0.2～1.0μg范围内具有良好的线性关系。2.6精密度试验精密吸取同一份供试品溶液（批号20030524）10μl，重复进样5次，测定其峰面积积分值，RSD为0.21%。结果表明：本方法精密

6、度良好。2.7重现性试验取同一批号样品（批号20030524）5份，按上述条件依法平行处理并测定含量（n=2），测定其峰面积积分值，RSD为1.43%。结果表明：本方法重现性好。2.8稳定性试验分别精密吸取同一份供试品溶液（批号20030524）10μl，于0、3、6、9、12h进样，测定其峰面积积分值，RSD为0.37%。结果表明，供试品溶液在12h内峰面积值基本稳定。2.9回收率试验精密称取已知含量为1.6093mg/g5（批号20030524）样品0.5g，共5份，分别精密加入苦参碱对照品溶液（50.20μg/mL）15ml，即0.753mg，

7、挥去甲醇，再按上述含量测定项下的方法测定含量，结果见表1。取苦参药材细粉约2g，照供试品溶液制备法依法测定，3批苦参药材中的苦参碱含量测定结果见表3，为保证产品的质量，规定投料药材苦参中苦参碱的含量应不得少于0.080%。3讨论3.1本品药味较多，成分复杂，本文对HPLC分析时的流动相系统组成和比例作了比较，对多种溶剂系统进行选择，采用乙腈－二乙胺，乙腈－0.1%三氟醋酸溶液等系统比较，根据分离情况，选用乙腈－三氟醋酸溶液(5：95)测定苦参碱含量，可使峰形变窄，提高分离度[3]。3.2考察提取工艺时，采用超声提取法，考察了甲醇、70%乙醇、2%醋酸

8、水溶液和氯仿的提取效率，结果表明：氯仿对苦参碱的提取效率最高，又考察了氯仿超声和浸渍提取方法，研究表明:超声