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《宫颈鳞癌的候选早期预警基因表达、hpv感染及现行临床诊断方法特异性筛查的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、宫颈鳞癌的候选早期预警基因表达、HPV感染及现行临床诊断方法特异性筛查的研究新疆医科大学博士学位论文宫颈鳞癌的候选早期预警基因表达、HPV感染及现行临床诊断方法特异性筛查研究姓名:阿比达.阿布都卡德尔申请学位级别:博士专业:劳动卫生与环境卫生学指导教师:丁岩2010-04摘要宫颈鳞癌的候选早期预警基因表达、HPV感染及现行临床诊断方法特异性筛查研究博士研究生:阿比达?阿布都卡德尔导师:丁岩摘要目的:宫颈癌是女性生殖系统昀常见的恶性肿瘤,宫颈癌位居我国妇癌第一位。新疆维吾尔族妇女宫颈癌患病率及病死率明显高于生活在同一个环境的其他民族,病死率在全国少数民族中占第一位。如何在宫颈癌早
2、期或癌前阶段找到预测宫颈癌及预后的指标和方法是宫颈癌防治中一个重要课题。本研究通过宫颈病变标本的特异性甲基化候选基因表达、HPV感染及现行宫颈癌临床诊断方法特异性的筛查分析,探讨一种宫颈癌早期预警和预后的综合指标体系,评价其可能性和可行性。本研究目的包括以下三个方面:1)宫颈癌组织内的抑癌基因启动子发生高度甲基化可能使基因表达水平下降或基因休眠。本研究从蛋白质水平观察四种宫颈鳞癌特异性高甲基化候选基因的蛋白表达水平与宫颈癌前病变病理进程的关系及其族群差异;2)对维吾尔族妇女不同宫颈病变组织进行人乳头状瘤病毒(humanpapilloma-virus,HPV)鉴定分析,探讨宫颈病
3、变病理进程与HPV感染率及其亚型的关系;3)基于临床诊断结果对液基薄层细胞学检测(ThinprepCytologicTest,(TCT)及阴道镜检查对宫颈病变的特异性、可行性及对临床早期诊断的应用价值进行分析与评价。方法:1)临床标本收集与免疫组织化学分析:根据新疆医科大学第一附属医院病理科在2006-2008年期间存档,收取汉族和维吾尔族妇女宫颈病变患者的福尔马林浸泡和石蜡包埋组织标本共218例,包括宫颈炎/CINⅠ79例,CINⅡ/Ⅲ89例,宫颈癌50例。根据不同文献资料,选择4种宫颈癌特异性高甲基化侯选基因,包括O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylgua
4、nine-DNAmethyl-transferase,MGMT)、死亡相关蛋白激酶(deathassociatedproteinkinase1,DAPK1)、人类白细胞抗原(humanleukocyteantigen-I,HLA-I)、雌激素受体α(estrogenreceptor-α,ERα)。采用免疫组织化学SP法和特异性抗体鉴定以上基因的蛋白质表达水平,研究候选基因蛋白质表达水平变化与宫颈病变病理进程的关系;2)临床标本收集、DNA制备和HPV鉴定:收集2005年-2008年在新疆医科大学第一附属医院妇科就治宫颈病变患者的石蜡包埋组织标本共223例,包括慢性宫颈炎38例,
5、CIN94例,宫颈鳞癌91例。制备组织DNA,采用HPV通用引物MY09/11(MY09:5′-CGTCCMARRG?1?新疆医科大学医学博士学位论文GAWA-CTGATC-3′;MY11:5′-GCMCAGGGWCATAAYAATGG-3′)、常规PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳和紫外成像方法筛选HPV阳性DNA标本。采用亚能生物公司提供的HPV分型芯片试剂盒,对HPV阳性的DNA标本的HPV亚类型别进行检测。该芯片可以鉴别23种常见的HPV亚型,包括5种低危HPV亚型:6、11、42、43、44;18种高危亚型:16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、5
6、8、59、66、68、73、83、MM4;3)阴道镜和TCT方法诊断宫颈病变的比较分析:根据新疆医科大学第一附属医院妇科临床诊断,系统记录4032例TCT和215例阴道镜筛查的病例信息,以组织病理学检查结果为验证标准,比较分析TCT和阴道镜诊断宫颈病变的特异性和可行性,以及对癌前病变的早期预警价值。结果:1)随着宫颈病变的病理进程,DAPK-1、ERα、HLA-I蛋白的表达逐渐减弱;在维、汉两族CINⅡ/Ⅲ和宫颈鳞癌中的阳性表达率明显低于宫颈炎/CINⅠ(P<0.05),在宫颈癌中的阳性表达率昀低;DAPK-1、ERα、HLA-I表达率变化趋势与两个族群的宫颈病变病理进程密切相
7、关。MGMT在汉族妇女宫颈炎/CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和宫颈鳞癌中的表达几乎不变;然而在维吾尔族妇女随着宫颈病变病理进程而逐渐升高,而且有统计学差异(P<0.05);2)223例宫颈标本中,HPV总阳性率为58.7%(131/223),随着宫颈病变级别的增加,HPV阳性率逐渐升高即慢性宫颈炎
