【硕士论文】芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.pdf

《【硕士论文】芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响摘要目的：芦荟凝胶(Aloegel，AG)是芦荟(Aloe)中重要的化学成分，其中含99％一--99．5％的PH为4--、，5的天然水份，固体成分主要为糖类、蛋白质、氨基酸、纤维素等。芦荟凝胶应用十分广泛，有报道芦荟凝胶可以应用于多种疾病的治疗，如：关节炎、痛风、痤疮、皮炎、烧伤和消化性溃疡等。人皮肤成纤维细胞(humanskinfibroblast，HSFb)是真皮主体细胞成分，大量的研究显示人皮成纤维细胞的异常生物学改变与皮肤衰老及皱纹形成有密切的关系。本研究拟以人皮肤成纤维细胞为研究对

2、象，施加不同浓度的芦荟凝胶，观察芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞的增殖活性及胶原蛋白合成的影响。方法：胶原酶消化法原代培养人皮肤成纤维细胞，应用单层成纤维细胞传代培养技术培养获得人皮肤成纤维细胞后，将芦荟凝胶加入到培养液中并作用于人皮肤成纤维细胞，实验分空白对照组和实验组，空白对照组仅加入培养液，实验组分别加入浓度为5％、10％、15％、20％的含芦荟凝胶DMEM培养液，同时实验设不同时相组，于芦荟凝胶作用后24h、48h、72h后进行检测。具体检测内容：1．光镜观察人皮肤成纤维细胞形态。2．四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测成纤维细胞增殖程

3、度。3．应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期的变化。4．碱水解法检测细胞培养液中羟脯氨酸含量。5．免疫组化法检测芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞I型前胶原表达的影响。结果：1．光镜观察显示5％，10％，15％芦荟凝胶作用后，与空白对照组相比，成纤维细胞无明显改变，而20％芦荟凝胶作用后成纤维细胞出现了增殖抑制现象。2．MTT比色法结果显示5％、10％、15％芦荟凝胶均对成纤维细胞有增殖促进作用，而20％芦荟凝胶表现出成纤维细胞增殖抑制。3．细胞周期时项分析结果显示量效组经5％、10％浓度芦荟凝胶处理后细胞周期Go／Gl期细胞百分率较对照组低(

4、P<0．05)，S+G2／M期细胞百分率及增殖指数PI值较对照组增高(P<0．05)，浓度为15％的芦荟凝胶培养液处理组成纤维细胞的Go／Gl期和S+G2／M期细胞百分率与对照组相比，差异均无统计学意义(P>0．05)。各芦荟凝胶组之间比较浓度为10％的芦荟凝胶培养液组PI值较其他芦荟组增高(P<0．05)，S+G2／M期细胞百分率较对照组明显增高(P<0．05)。时效组检测结果显示在不同时间点检测的细胞周期差异无统计学意义抄O．05)。4．各浓度芦荟凝胶组在不同时间段时其成纤维细胞培养液中羟脯氨酸含量明显高于空白对照组(P<0．05)

5、，各浓度芦荟组之间比较得出10％芦荟组较5％、15％芦荟组更能增加成纤维细胞培养液中羟脯氨酸含量(P<0．05)。各芦荟组72h与24h的羟脯氨酸含量相比，差异有统计学意义(P<0．05)。5．经10％浓度芦荟凝胶处理后的成纤维细胞I型前胶原表达较空白对照组增加(P<0．05)。结论：1．光镜观察和MTT比色法结果显示适宜浓度的芦荟凝胶能很好的促进成纤维细胞的增殖。2．通过流式细胞仪测定细胞周期分布证实一定浓度的芦荟凝胶作用后的人皮肤成纤维细胞的Go／G。期细胞所占百分率下降，S+G2／M期细胞所占百分率及PI值明显增高，推测其可能作用

6、机制是促使静止态的Go／Gl期细胞活跃而向S+G2／M期转变，使DNA合成量增加，从而促进细胞的增殖。3．适宜浓度的芦荟凝胶痛风http://www.915786.com/能增加培养液中羟脯氨酸含量且在作用后72h达最高水平，免疫组化法显示经芦荟凝胶作用后人皮肤成纤维细胞I型前胶原表达也增加。说明芦荟凝胶能有效促进人皮肤成纤维细胞胶原的合成。4．为芦荟凝胶应用于延缓皮肤衰老及皱纹的形成提供了理论依据。关键词：芦荟凝胶；成纤维细胞；细胞周期；羟脯氨酸；I型前胶原痛风http://www.915786.com/痛风http://www.91

7、5786.com/EffectofAloegeloncellproliferationandsynthesisofcollageinculturedhumanskinfibroblastAbstract：objective：Thealoegel(Aloegel，AG)istheimportantchemicalcompositionofaloe(Aloe)，itcontains99％～99．5％naturalmoisture(PH4-5)，solidingredientmainlyforcarbohydrate，protein，amin

8、oacid，celluloseandSOon．Thealoegelapplicationisverywidespread，ithasreportedthatthealoegeltobepossibletoa