栀子提取物t9、th抗单纯疱疹病毒1型作用机理研究

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1、栀子提取物T9、nI抗单纯疱疹病毒l型作用机理研究英文缩略词表英文缩写英文全称中文蝴：atrans—inducingfactora基因反式诱导因子acyclovir无环鸟苷adenovirus腺病毒coolingcharge-coupleddevice冷却慢扫描电荷耦合器件CytotoxicTcell细胞毒性T细胞Diethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯50％effectiveeoncentration半数有效浓度FITc—Herpersimplevirus一1FITC标记的鹏v．1Famcicloir泛昔洛韦foodanddrugadministr

2、ation食品与药物管理局Fluoresceinisothiocyantet异硫氰酸FlnouresenceRecoveryAfterPhotobleaching荧光漂白恢复法PhotobleachingGcvGanciclovir更昔洛韦lISV-IHerpersimplevirus-1单纯疱疹病毒1型IL-6Interleukin．6白细胞介素-6IFN—YInterferongamma干扰素viv．intravenous静脉注射^毗cmajorhistocompatibilitycomplex主要组织相容性复合体Nl【naturalkiller自然杀伤PB

3、Sphosphate-bufferedsaline磷酸盐缓冲溶液PCVpenciclovir喷昔洛韦PFAphosphonoformate膦甲酸钠PIVparainfluenzavirus副流感病毒PFUplaqueformingunits空斑形成单位RSVrespiratorysyncytialvirus呼吸道合胞病毒RT-PCRreversetranscriptionpolymerasechain逆转录多聚酶链式反应reactionSPTsingleparticletracking单个微粒运动观察技术ThThelpercellT辅助细胞TNFtumornec

4、rosisfactor肿瘤坏死因子vCVvalaeiclovir伐昔洛韦VGCVvalganciclovir伐更昔洛韦VHSvirionhostshutoffprotein内膜蛋白VICVPl6-inducedcomplexVPl6诱导复合物VPl6viralprotein16间层蛋白VZVvaricellazostervirus水痘带状疱疹病毒畔暑翟焉亨竺脚原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师指导下独立完成的，文中除注明引用的内容外，不包含任何其它已经发表的科研成果。对本文研究做出重要贡献者，已在文中以明确方式表明。本声明的法律责任完全由自己承担

5、。论文作者签智导师签名关于学位论文使用授权的声明日期本人完全知道中国中医科学院有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权中国中医研究院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名日期中文摘要病毒性疾病对人类的危害日趋严重，原有病毒病的死灰复燃及新增病毒病的不断出现，为世界医学界带来极大的挑战。虽然疫苗在以往控制病毒性疾病中发挥了极大的作用，但由于多种原因使彳导疫苗的研制受到极大的限制。

6、而现有的抗病毒化疗药物不仅疗效不确切，达不到广谱高效的效果，易产生抗药性，而且在杀灭病毒的同时严重干扰正常细胞代谢而显示出明显的毒副作用，同样临床应用受限，发展缓慢。因此寻找安全、有效的抗病毒手段迫在眉睫。中药治疗病毒性疾病有几千年的历史，具有高效、广谱、低毒和疗效相对稳定等优点，且中草药自然资源丰富、品种繁多。但中药抗病毒的机理仍未被真正认识，因而限制了其开发应用。随着现代生物学技术的发展和新的模型在大规模抗病毒药物筛选中的应用，为抗病毒药物的开发提供了广阔的前景，因而也为从中药中寻找有效的抗病毒成分及揭示其机理提供了极好的条件。本课题在原有研究工作的基础上，

7、筛选出具有明显抗HSV活性的栀子提取物T9、TH，并探讨其抗单纯疱疹病毒的作用靶点；为揭示中药的抗病毒机理、开发针对性治疗HSV并具有自主知识产权的现代中药奠定坚实的基础。一、栀子提取物T9、111对单纯疱疹病毒l型VPl6的影响VPl6是HSV一1的结构蛋白，在病毒复制晚期参与病毒颗粒的组装，同时又作为重要的功能蛋白在病毒感染早期发挥重要的转录调节功能。VPl6基因的表达已经被看作是单纯疱疹病毒复制发生的标志之一。正是由于VPl6在HSV一1感染中的重要作用，本实验采用对疱疹病毒易感的BALB／C小鼠，以HSV-VPl6为研究对象，用RT—PCR方法，半定量比

8、较不同组别间HSV-VP