阴沟肠杆菌耐药机制的分析

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1、目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1Abstract⋯⋯⋯⋯.⋯..⋯⋯....⋯⋯⋯..⋯.⋯⋯...⋯...⋯...⋯⋯...⋯41前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81.1研究背景⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..81.2研究目的⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..1O1.3研究内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..102.阴沟肠杆菌的耐药性及ESBLs的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112.1材

2、料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..112.2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..132.3讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯193.整合子与阴沟肠杆菌耐药性的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯233.1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..233.2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..293.3讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯324.阴沟肠杆菌整合子可变区耐

3、药基因的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯344.1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..344.2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..374.3讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯425.qnr基因对阴沟肠杆菌耐药性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..435.1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..435.2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..455.3讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯496CTX.M型ESBLs与阴沟肠杆菌耐药性的研究⋯⋯⋯⋯⋯..516.1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯516.2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..536.3讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58d、结............................⋯...⋯⋯⋯..⋯.....⋯.....⋯⋯.......................62参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯64综j《£....................................................................................70综述参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯77致谢⋯⋯⋯..⋯⋯..⋯⋯⋯..⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯.....⋯.....。.⋯⋯8l附录一技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82附录二缩写词中英对照⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯83附录三SPSS应用程序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.84附录四测序比对结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.85附录五,在读硕士期间的科研教学情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.106阴沟肠杆菌耐药机制的研究中文摘要【目的】在明确阴沟肠杆菌耐药现状的基础上,阐明整合子的流行现状、分布(定位)及耐药基因盒种类;并进一步探明CTX.M型ESBLs与qnr基因的流行状况,探讨整合子、CTX.M型ESBLs、qnr基因与耐药性的关系,为合理使用抗生素,控制耐药菌株播散提供理论依据。【方法】1.采用全自动微生物分析仪(VITEK32)鉴定细菌。2.抗

7、生素敏感性试验:采用纸片扩散法(K.B法)测定70株阴沟肠杆菌对18种抗生素的敏感性;采用琼脂稀释法测定70株阴沟肠杆菌对4种抗生素的最小抑菌浓度。3.PCR扩增阴沟肠杆菌质粒和染色体上的整合子及整合子阳性株中的可变区耐药基因,并做测序分析。4.PCR扩增质粒上的qnr基因,并做测序分析。5.采用双纸片协同法筛选ESBLs阳性菌株。PCR扩增阴沟肠杆菌质粒和染色体上的CTX.M型ESBLs基因,并做测序分析。【结果】1.共分离出70株阴沟肠杆菌,主要的标本来源为痰液、尿液和血液,分别占标本来源的52.996、17

8、.6%和11.8%。阴沟肠杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率最低,均100%敏感,耐药率最高的是头孢唑林和氨苄青霉素,也均为100%,其他抗生素均表现出不同程度耐药。2.70株阴沟肠杆菌中有47株检测到I类整合子,阳性率为67.14%,仅在染色体DNA中检测到I类整合子的有9株,阳性率为12.85%,占阳性株的19.15%:仅在质粒DNA中检测到I类整合子有10株,阳性率为

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