海蜇生殖腺酶解物抗氧化活性的研究

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1、第33卷第2期球产科学Vol_33No．22014年2月FISHERIESSCIENCEFeb．2014海蜇生殖腺酶解物抗氧化活性的研究郑杰，于笛，陈冲，袁成玉(辽宁省海洋水产科学研究院，辽宁大连116023)摘要：为提高海蜇的综合利用率，利用木瓜蛋白酶酶解技术制备海蜇生殖腺酶解物。分析酶解物的氨基酸组成，并通过体外化学模拟体系评价酶解物与Fe螯合前后的抗氧化活性。试验结果表明，海蜇生殖腺酶解物含有l7种氨基酸，具有一定的Fe螯合能力和DPPH·清除能力，其螯合率和清除率达到5O时的质量浓度分别为1．73mg／mL和22．20mg／mL。同时，具有一定

2、的还原能力，其在700nm处吸光值达到0．5时的质量浓度为17．61mg／mL。海蜇生殖腺酶解物与Fe螯合后，抗氧化能力显著增强，DPPH·清除率达到5O和在700nm处吸光值达到0．5时的质量浓度分别为0．15mg／mL和0．86mg／mL关键词：海蜇；生殖腺；酶解；抗氧化活性；螯合中图分类号：TS254．9文献标识码：A文章编号：1003一Iii1(2O14)02—0081—06生物活性肽是指除了提供氮源和氨基酸等基工开发利用。有研究者分别从海蜇脂肪酸组成[1引、本营养成分之外，对机体还具有许多潜在生理功能海蜇糖胺聚糖提取纯化[】、海蜇降血压活性肽

3、制的蛋白质片段[1]，水产品由于其较高的蛋白含量和备口。和海蜇毒素活性评价[1等方面对海蜇进行了特殊的生存环境而成为制备生物活性肽的良好来研究，但对海蜇加工过程中蛋白含量较高的副产源。其中，抗氧化活性肽作为研究最为广泛的一类物——生殖腺的研究较少，其尚未得到充分的开发活性肽，是指具有抑制生物大分子过氧化或清除体和利用。因此，本研究采用外源酶生物酶解的方法内自由基功效的生物活性肽[2]，其制备方法和途径制备海蜇生殖腺酶解物，并考察其体外抗氧化活主要包括溶剂提取法、微生物发酵法和生物酶解性，旨在为海蜇生殖腺的进一步开发利用提供理论法[3]。其中，生物酶解法

4、因具有反应条件温和、水解依据。过程容易控制等优点而在食品领域得到广泛应用[4]。1材料与方法目前，国内外众多研究学者已经利用外源酶生物酶解的方法分别从光棘球海胆(Strongylocentrotusnudus)1．1试验材料性腺[5]、虾夷扇贝(Patinopectenyessoensis)裙边]、鱿1．1．1原料与试剂鱼(Dosidicusgigas)鱼皮[7]、皱纹盘鲍(Haliotis经过蒸煮预处理的海蜇生殖腺，由辽宁营口市discushannai)内脏和金枪鱼(Thunnusobesus)实发参蜇产业(集团)股份有限公司提供，一20℃贮脊骨[g

5、等水产加工副产物原料中制备得到了抗氧存备用。经测定，其粗蛋白含量为13．309／6(以湿基化活性肽。计)。1，1--苯基一2一三硝基苯肼(DPPH·，CH：海蜇(Rhopilemaesculentum)是生长在海洋中N0)购于Sigma公司；木瓜蛋白酶，购于广西南宁营浮游生活的大型近岸暖水性水母类动物[1。。，水温庞博生物工程有限公司；试验过程中所用其他试剂和盐度的适应范围较广，广泛分布于我国黄渤海等均为分析纯。沿海地区，资源丰富，经济价值较高[1。海蜇营养1．1．2仪器设备十分丰富，有“水产瑰宝”之美称[1，但其含水量高，JYL—D051料理机(九阳

6、股份有限公司)；DF一收获常在温度较高的夏秋季节，如不及时处理，极101S集中式恒温加热磁力搅拌器(巩义市英峪予华易腐烂变质，造成资源的极大浪费，亟需进行深加仪器厂)；FE20K型精密pH计(梅特勒一托利多仪收稿日期：2013—06—13；修回日期：2013-08—05．基金项目：辽宁省海洋与渔业厅资助项目(201207)．作者简介：郑杰(1981一)，男，助理研究员，博士；研究方向：低值水产品高值化利用．E—mail：zhengjiessd@163．corn．水产科学第33卷器有限公司)；Eppendorf5430R台式高速冷冻离12,℃水浴加热20

7、rain后加入1mL三氯乙酸溶液机(德国艾本德股份公司)；AI204电子分析天平(10)终止反应。混匀后，4000r／rain离心10(梅特勒一托利多仪器有限公司)；MS3基本型旋涡rain。取2mL上清液，并加入2．5mL去离子水和混合器(德国IKA集团)；UV752型紫外可见分光0．3mLFeC1。溶液(0．1)，室温静置10rain后，于光度计(上海佑科仪器仪表有限公司)；ALPHA2-4700nm下测定吸光值。吸光值越高表示还原能力LDPLUS型冷冻干燥机(德国CHRIST公司)；越强，以Vc为阳性对照。HH一4数显恒温水浴锅(常州澳华仪器有限

8、公司)。1．2．6海蜇生殖腺酶解物亚铁螯合物的制备1．2试验方法参考文献[191所述方法进行海