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《心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
分类号：单位代码：１０４４１２００９７１５９密级、学号：：＇＂＇＇＂＝＂齡．扔＇Ｖ‘，管＾；硕Ｊ字也哺乂乂Ｓ＇‘文题目：心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛句滞血癖证）的实验研究及临床观察ＥｘｅｒｉｍｅｔｉｔａｌａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｏｎｔｒｅａｔｉｎ英文题目；ｐｙｇ－－ｎｉｎａ（ｉｓｔａｇｎａｔｉｏｎｉｎｄｕｅｔｅｄｂｌｏｏｄｓｔａｓｉｓａｇ？８＇Ｊ皆選Ｌ遂七ｊ，ｐｅｃｔｏｒｉｓｏｆＣＨＤｗｉｔｈＸｉｎｋｅｓｈｕ９ｈ痴给》ＭＭ＇黑乃豪申请人姓名入学年月２００９年９月学科专Ｉｌｋ中医内科学指导教师牟林茂董波临床医学专业学位＾ｙＩＩｇ２０１６５２０年月日 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立完成的，文中除注明引用的内容外，不包含任何其他已经发表的科研成果。对本文研究做出重要贡献者，均已在文中Ｗ明确方式表明。本声明的法律责任完全由自己承担。０论义作者签名导师絶日谋若、＞Ｉ关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权山东中医药大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名导师签名日期＾ 提要目的：从动物实验和临床研究两方面，探讨心可舒的临床疗效、安全性及其抗动脉粥样硬化的内在机制。(1)动物实验方法：36只新西兰大白兔随机分4组，分别为对照组、高脂AS模型组、氟伐他汀组及心可舒组，每组9只。通过HE染色评估粥样斑块的程度。应用免疫组化检测巨噬细胞、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达，蛋白免疫印迹法分析斑块VCAM-1的表达水平。结果：1）HE示：心可舒组、氟伐他汀组、高脂组内膜都存在斑块的形成，以高脂组动脉斑块最为明显,而心可舒组及氟伐他汀组的斑块增厚相对较小，对照组血管形态正常。2）心可舒组VCAM-1的表达明显低于高脂组的水平(P<0.01)。3）心可舒组巨噬细胞、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的水平亦明显低于高脂组(P<0.01)。(2)临床试验方法：从山东省立医院心内科及中医科门诊收集符合冠心病心绞痛气滞血瘀证诊断标准的患者，将这60例患者，按照随机分组的原则，分为2组。对照组30例，给予常规用药；治疗组30例，在常规用药上加服心可舒，一次四粒,每日三次，4周后进行临床疗效评定。分别对两组患者心绞痛程度、中医证候、心电图及安全性检测等综合分析，继而评价其疗效和安全性。结果：1）临床研究发现,在中医证候积分上,与对照组比较治疗组效果更显著(P<0.01)。2）在心绞痛发作次数、持续时间，硝酸甘油用量，心电图变化，证候疗效方面，治疗组优于对照组(P<0.05)。结论：临床研究发现，心可舒胶囊在临床治疗气滞血瘀型稳定型心绞痛初步取得一定疗效，是一个安全有效的方剂；基础研究证实，心可舒可通过抗炎作用保护血管内皮及抗动脉粥样硬化。总之，心可舒可以有效治疗冠心病稳定型心绞痛。关键词：心可舒；稳定型心绞痛；气滞血瘀；临床研究；动物实验 ExperimentalandClinicalstudyontreatingQi-stagnationinduetedblood-stasisanginapectorisofCHDwithXinkeshuSpeciality:InternationalMedicineofTraditionalChineseMedicineWriter:HeinaihaoTutor:Prof.MuLin-maoProf.DongboAbstractObjective:Fromtwoaspectsofanimalexperimentandclinicalresearch,toobservetheeffectofXinkeshu(XKS)ontheclinicalefficacyandsecurity，andanalysisitsmechanismofanti-atherosclerosis..（1）AnimalexperimentsMethods：divideNewZealandrabbitsintofourgroupsbyrandom：normalcontrolgroup,high-fatgroup,fluvastatingroupandXinkeshu(XKS)group(9/pergroup).TheatheroscleroticplaqueswereevaluatedbyHEstaining.ExpressionofMMP-9,macrophageandα-SMAinatheroscleroticplaquesweredetectedbyimmunohistochemistry.Results:1）Thehighfatgroup,Xinkeshugroupandfluvastatingroupbothhaveatheroscleroticplaqueformation.Thehighfatgroupwasobvious.Xinkeshugroupandfluvastatingrouphadlesssmallerplaqueformationthanhighfatgroup.Thecontrolgrouphadnoplaqueformation.2）Comparedwithhigh-fatgroup,theexpressionsofVCAM-1inatheroscleroticplaquessignificantlydecreasedwiththetreatmentofXinkeshu(P<0.01).3)TheexpressionofMMP-9，macrophageinfiltrationandα-SMAwerealsolowerintheXKSgroupthanthatinhigh-fatgroup(P<0.01).（2）ClinicaltrialsMethods：accordingtothecasesintothestandard,atotalof60patientswithQi-stagnationinduetedblood-stasisstableanginapectorisofcoronaryheartdisease(CHD)，choosingfromdepartmentoftraditionalChinesemedicineandcardiologyoutpatientsoftheProvincialHospitalAffiliatedtoShandongUniveristy，wererandomlydividedinto2groups.30casesincontrolgroup,onlyweretreatedwithbasictreatmentand30casesintreatmentgroupasweretreatedwithbasictreatmentandXinkeshutablet2#,Tid.4weekslater,theclinicalcurativeeffectevaluation.Respectivelyontwogroupsofpatientswiththedegreeofanginapectoris，TCMsyndrome,electrocardiogramandsafetytestwere observedandcomparedtoevaluatetheefficacyandsafety.Results:1）Clinicalresearchconfirms,intreatmentofTCMsyndromeintegral,thetreatmentgrouphadobviousimprovement,andbetterthanthecontrolgroup，(P<0.01).2）Inthetreatmentgroup,anginapectorisfrequency,lastingtime,thedosageofnitroglycerin,ECGmanifestationsandtraditionalChinesemedicinesymptomscurativeeffectwerebetterthanthatofthecontrolgroup(P<0.05).Conclusion:XinkeshuinclinicaltreatmentofQi-stagnationinduetedblood-stasisanginapectorisofCHDachievedcertaineffect,isasafeandeffectiveprescription；BasicresearchsconfirmthatXKSplayanimportantroleintheprotectionofendothelialfunctionandanti-atherosclerosiseffectbyitsanti-inflammatory.Inaword,XKScanbeeffectiveinthetreatmentofstableanginapectorisofCHD.Keywords：Xinkeshu;stableanginapectoris;Qi-stagnationinduetedblood-stasis;clinicalresearch;Animalexperiments 目录引言................................................................................................................................1第一部分实验研究..............................................................................................................21.材料.................................................................................................................................21.1主要仪器..........................................................................................................................21.2实验动物:........................................................................................................................31.3主要试剂:........................................................................................................................31.4主要试剂的配制..............................................................................................................42方法....................................................................................................................................62.1兔AS模型的建立...........................................................................................................62.2病理标本的釆集..............................................................................................................72.3病理组织学检测..............................................................................................................72.4统计学处理....................................................................................................................113结果..............................................................................................................................123.1心可舒对AS斑块的影响.............................................................................................123.2心可舒对AS斑块中巨噬细胞、MMP-9和α-SMA表达的影响..............................123.3心可舒对VCAM-1表达的影响..................................................................................13第二部分、临床研究..........................................................................................................141试验设计..........................................................................................................................141.1试验设计类型:随机、平行、对照设计。...................................................................141.2试验设计原则................................................................................................................142病例选择...........................................................................................................................142.1诊断标准.......................................................................................................................142.2心绞痛症状记分法.......................................................................................................152.3心绞痛症状病情分级标准...........................................................................................152.4中医症状记分法............................................................................................................152.5中医症状积分分级标准................................................................................................152.6纳入标准.......................................................................................................................152.7排除标准........................................................................................................................16 3治疗方案...........................................................................................................................163.1治疗方法.......................................................................................................................163.2观察指标.......................................................................................................................164疗效判定标准..................................................................................................................164.1心绞痛症状疗效判定标准...........................................................................................164.2心电图疗效判定标准...................................................................................................174.3中医证候疗效判定标准...............................................................................................175统计学处理......................................................................................................................176一般资料分析..................................................................................................................176.1两组基本资料比较........................................................................................................177研究结果..........................................................................................................................177.1心绞痛疗效比较............................................................................................................177.2心绞痛发作疗效比较....................................................................................................187.3心电图疗效比较............................................................................................................187.4中医证候积分疗效比较................................................................................................187.5中医证候疗效比较........................................................................................................197.6安全性检测结果...........................................................................................................19讨论..............................................................................................................................201.中医学治疗冠心病心绞痛认识.....................................................................................201.1病因病机认识...............................................................................................................201.2本证病因病机认识.......................................................................................................202心可舒胶囊药物组成及分析..........................................................................................212.1方药组成：...................................................................................................................212.2本方功效：活血化瘀，行气止痛。...........................................................................212.3本方方义：...................................................................................................................212.4方药分析.......................................................................................................................212.5现代药理研究...............................................................................................................223西医稳定型心绞痛的认识..............................................................................................234结果分析........................................................................................................................24 4.1实验结果分析...............................................................................................................244.2临床结果分析...............................................................................................................24结语..............................................................................................................................26参考文献..............................................................................................................................27综述..............................................................................................................................29 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察引言冠状动脉粥样硬化性心脏病指冠状动脉（冠脉）发生粥样硬化致使血管腔变狭窄或被堵塞，因而导致心肌缺血、缺氧或坏死而引起的心脏病。各种动脉硬化共有的特点是动脉管壁逐渐增厚变硬、失去原有的弹性和管腔变窄、缩小。稳定型心绞痛，其[1]发作程度、频率、性质及诱因在几周内没有明显变化。而冠心病稳定型心绞痛，这一名词，在我国古代医学典籍中很难查到，根据它的发病特点，可近似归到“心痛、胸痹”类别中。最早可以在《山海经》中见到“心痛”。也可以在现存最早的古医籍《五十二病方》中查到关于“心痛”的记录。“胸痹”一词要追溯到《黄帝内经》曰：“善病胸痹喉痹逆气”。而胸痹的正式出现，是到了两汉时期，由张仲景在《伤寒杂病论》提出。一般认为，本病的发生多和寒邪、饮食、情志、劳倦、体虚等病因侵犯心系，破坏其内在的阴阳平衡有关。从临床表现角度观察本病属本虚标实之证，本虚在于气、[2]血、阴、阳亏虚，标实在于气滞、血瘀、寒凝、痰浊等。温玉平等根据临床经验认为，胸痹具体可以分为八种证型，包括气滞血瘀型、胸阳痹阻型、气郁化火型、气虚血瘀型、阳虚血瘀型、气阴两虚型、阳气虚损型和阳虚欲脱型。在辨证治疗上，首先辨别虚实，分清标本。再者要辨别病情轻重。在治疗原则上，先治其标，后治其本，必要时根据虚实标本主次，兼顾同治。近些年，冠心病逐年升高，并日趋呈现年轻化。现代医学对于稳定型心绞痛治疗方法，主要仍以药物治疗为首选。常用药物如硝酸酯类、β受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）类、血管紧张素受体拮抗剂（ARB）类、钙离子拮抗剂、抗血小板聚集药、调脂类等药物。而中医学在冠心病的预防治疗方面取得了很大的进步，有了日新月异的变化，诊断标准也越来越规范化。中医药治疗在冠心病中以副作用少，安全性相对较高并且临床疗效显著特点显示出广阔的前景，越来越受到人们的青睐。本次研究通过实验观察心可舒对兔动脉粥样硬化模型炎症影响及治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）临床疗效，进一步阐明其治法的作用机制，希望为本病的科研及临床提供新思路、新方法。1 山东中医药大学2016届硕士学位论文第一部分实验研究符号说明英文缩写英文名称中文名称ggram克mgmilligram毫克ugmicrogram微克hhour小时minminute分钟ssecond秒Lliter升mLmilliliter毫升μlmicroliter微升rrevolution转数rpmrevolutionperminute每分转数Pprobability概率ASatherosclerosis动脉粥样硬化HEhematoxylinandeosin苏木素一伊红染色SMCssmoothmusclecells平滑肌细胞MMPmatrixmetalloproteinase基质金属蛋白酶DAB3’3'-diaminobenzidine3,3-二氛基联苯胺PMSFphenylmethanesulfonylfluoride苯甲基磺酰氟PVDFpolyvinylidenefluoride聚偏氟乙烯膜MCP-1monocytechemoatacticfactor-1单核细胞趋化蛋白-1VCAM-1vascularcelladhesionmolecule-1血管细胞黏附分子-1MMP-9MatrixMetalloproteinases-9基质金属蛋白酶-9α-SMAalpha-smoothmuscleactinα-平滑肌肌动蛋白2 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察1.材料1.1主要仪器仪器生产厂家自动双重纯水蒸馏器上海亚荣生化仪器厂生产自动脱水机德国LEICA公司普通离心机上海安亭科学仪器有限公司石蜡包埋机德国LEICA公司石蜡切片机德国LEICA公司染色机德国LEICA公司pH测定仪美国ORIEN公司转膜槽北京市六一仪器厂电泳仪北京市六一仪器厂GalanzWP700S型微波炉广东顺德格兰仕电器厂有限公司电热恒温水温箱德国LEICA公司水平摇床北京市六一仪器厂光学显微镜日本Olympus电热恒温水浴箱上海医疗器械厂电子分析天平上海博通经贸有限公司图像分析软件:Image-ProPlus5.0美国MediaCybernetics公司全自动生化分析仪日本OLYMPUS-40°C冰箱日本SANYO公司超灵敏化学发光仪日本富士公司,多功能检测仪美国thermoscientific公司1.2实验动物:普通级新西兰大白兔36只，体重量：2.36-2.92kg，购自山东济南西岭动物实验;许可证号：鲁SCXK20150001。1.3主要试剂:1)双氧水,购自北京中杉集团公司化工厂2)枸椽酸，购自国药集团化学试剂有限公司3)枸椽酸钠，购自上海星火制药厂4)氯化钠,购自国药集团化学试剂有限公司5)氯化钾,购自国药集团化学试剂有限公司6)磷酸氧二钠,购自上海鑫达精细化工有限公司7)磷酸二氧钠,购自上海鑫达精细化工有限公司33 山东中医药大学2016届硕士学位论文8)小鼠抗MMP-9抗体,购自美国Merk公司9)小鼠抗兔单核巨噬细胞抗体(RAM11),购自丹麦DAKO公司10)小鼠抗α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,购自英国Abcam公司11)EnVision酶标羊抗小鼠抗体,购自北京中山生物制剂公司12)EnVision酶标羊抗兔二抗,购自北京中山生物制剂公司13)DAB显色试剂盒,购自武汉博士德公司14）胆固醇,购自上海正翔化学试剂公司15)兔抗小鼠VCAM-1抗体(ab134047),购自英国Abcam公司16)蛋白裂解液（P0013B）,购自江苏碧云天生物技术研究所17)蛋白酶抑制剂（ST506）,购自江苏碧云天生物技术研究所18)蛋白上样缓冲液（P0015）,购自江苏碧云天生物技术研究所19)Westrn—抗稀释液（P0023A）,购自碧云天生物研究所20)凝胶配制试剂盒（P0012A）,购自碧云天生物研究所21)PVDF膜,购自晶美生物工程有限公司22)蛋白marker（#SM010671）,购自美国Fermentas公司23)发光试剂盒(eECLWesternBlotKit)（CW0049）,购自康维世纪公司24)心可舒胶囊，购自山东沃华医药公司1.4主要试剂的配制1.4.10.2MPB(PH=7.4,1000ml)Na2HPO4·12H2O58.02gNaH2PO4·2H2O5.93g适量双蒸水溶解，后定容至lL,pH调至7.4，备用。1.4.24%多聚甲醛(0.1MPB,PH=7.4,1L)双蒸水400ml多聚甲醛40g将多聚甲醛溶于双蒸水，加热搅拌,温度介于62°C-70°C时,滴加1mol/LNaOH适量至溶液澄清,然后放入0.2MPB500ml,最后加双蒸水定容至1L,pH调至7.4,4C冰箱保存备用。1.4.3Harris苏木素染液:4 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察甲液:苏木素1g无水酒精10ml乙液:硫酸铝钾20g双蒸水200ml分别将两液体加热溶解，后混匀,继续加热至沸腾,后停止加热，稍等溶液不沸腾时加入0.5g黄色氧化汞,并同时搅拌,当溶液转变为深紫色时，立即放到预先准备的冰水中，使其快速降温，然后过滤,使用前需加入冰醋酸8ml。1.4.41%伊红染液:伊红1g75%乙醇l00ml量取75%乙醇100ml使固体全部溶解,备用。1.4.51%盐酸酒精:75%乙醇105ml36%浓盐酸3mL配成108ml的1%盐酸酒精,备用。1.4.6枸橼酸盐缓冲液(0.01M,PH=6.0):贮存液:A;0.1M枸橼酸溶液:21.01g枸橼酸(C6H807·H2O)先用适量双蒸水溶解，后定容至1L;B:0.1M枸橼酸钠溶液:29.41g枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)加双蒸水定容至1L;工作液:用量筒分别量取A液3.6ml、B液16.4ml，混匀,双蒸水定容至200ml,pH调至6.0。1.4.71xPBS的配制(pH=7.4,l000ml):Nacl8.0gKcl0.2gNa2HP04·12H202.9gKH2P040.2g适量双蒸水溶解，后定容至lL,pH调至7.4，备用。1.4.8l0×Tris-甘氨酸:5 山东中医药大学2016届硕士学位论文Tris30g甘氨酸144g适量双蒸水溶解，后定容至lL1.4.9转膜液:10×Tris-甘氨酸l00ml甲醇200ml混匀，双蒸水定容至1L1.4.1020%SDSSDS20g适量双蒸水溶解，后定容至l00ml1.4.11电泳液配制10×Tris-甘氨酸l00ml20%SDS5ml双蒸水定容至lL。1.4.1210×TBST配制Tris24.2gNacl80g适量双蒸水溶解，后定容至lL，备用1.4.131×TBST配制10×TBST100mlTween-20lml双蒸水定容至1L,PH调至7.61.4.145%封闭液脱脂奶粉5g1×TBST100ml振荡器上搅拌充分溶解2方法2.1兔AS模型的建立将36只新西兰大白兔,适应性常规饲料喂养1周后,随机分4组，正常对照组、6 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察高脂模型组、心可舒组和氟伐他汀组，每组9只。对照组饲以普通颗粒饲料，其他组动物均饲以高胆固醇饲料(1.5%胆固醇、5%猪油的颗粒饲料)，心可舒组、氟伐他汀组在饲以高胆固醇饲料基础上分别加心可舒0.5g/kg·d)、氟伐他汀20mg/(kg·d）。喂养32周后麻醉处死。2.2病理标本的釆集喂养32周后麻醉处死,用3%戊巴比妥钠以1m/kg注射剂量麻醉新西兰兔,大约3min，麻醉起效，后将新西兰兔四肢及牙固定在手术台上,快速打开胸腔，抽血，剪掉右心耳，灌注，剥离出胸主动脉,去除主动脉外多余的脂肪组织,最后把主动脉放入4%的多聚甲醛中固定,备用。2.3病理组织学检测2.3.1标本的处理:把经过4%多聚甲醒溶液固定后的兔胸主动脉切成2-3nm长度的小块,石蜡包埋。步骤：a将组织固定24小时后，流水冲6小时;b乙醇梯度脱水①70%乙醇2h;②80%乙醇2h;③90%乙醇2h;④95%乙醇I1h;⑤95%乙醇II1h;⑥100%乙醇I45min;⑦100%乙醇Ⅱ45min;c二甲苯透明①二甲苯I45min;②二甲苯II45min;d浸蜡①石蜡I1h;②石蜡II1h;e石蜡包埋,常温储存,备用。7 山东中医药大学2016届硕士学位论文2.3.2病理切片的制备将各个蜡块连续切厚约5mm切片,65°C烤2h,用于HE染色及检测MMP-9、巨噬细胞、α-SMA。2.3.3常规HE染色1)石蜡切片放置染色机中脱蜡至水;①烤片30min;②二甲苯I10min;③二甲苯II10min;④100%乙醇5min;⑤95%乙醇4min;⑥90%乙醇3min;⑦80%乙醇2min;⑧70%乙醇2min;2)Harris苏木素染3min;3)水洗2min;4)1%盐酸酒精分化5一10s,立即至水中;5)流水冲5min;6)伊红染2min;7)水洗30s;8)常规脱水透明:①70%乙醇30s;②80%乙醇1min;③90%乙醇90s;④95%乙醇2min;⑤100%乙醇I5min;⑥100%乙醇Ⅱ5min;⑦二甲苯I5min;⑧二甲苯II5min;⑨中性树胶封片，晾干;8 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察2.3.4免疫组织化学染色检测巨噬细胞、MMP-9和α-SMA的表达的表达1)石蜡切片放置染色机中脱蜡至水①烤片30min,②二甲苯I15min;③二甲苯II15min;④100%乙醇5min;⑤95%乙醇4min;⑥90%乙醇3min;⑦80%乙醇2min;⑧70%乙醇2min;⑨自来水I2min;⑩自来水II2min;⑾自来水III2min⑿自来水IV2min。2)3%H2O2处理15min;3)1×PBS洗5min×3次;4)抗原修复将切片转移至装有枸橼酸盐缓冲液容器中，高火加热约150s，至盒内修复液温度保持在92°C-98°C之间,转为低火，并持续该温度15-20min;5)取出切片,冷却40min;6)1×PBS洗5min×3次;7)甩干，正常山羊血清封闭，孵育20min;8)甩去血清,滴加适当比例的一抗,并随机选取一组织做阴性对照滴加1xPBS,把切片放于湿盒内，4°C过夜;9)1×PBS洗5min×3次;10)甩干，组织滴加适量生物素标记的山羊抗兔IgG二抗,37°C孵育40min11)1×PBS洗5min×3次;12)甩干，组织滴加适量辣根酶标记的链霉卵白素工作液,37。C孵育15min;13)1×PBS洗5min×3次;9 山东中医药大学2016届硕士学位论文14)甩干，暗室中，显微镜下，切片组织上滴加适量DAB显色液,显色理想后，快速置于双蒸水中，终止显色;15)Harris苏木素染核3min;16)流水冲洗苏木素3min左右;17)1%盐酸酒精分化5一10s;18)流水冲洗3min,镜下观察;19)常规脱水透明:①70%乙醇30s;②80%乙醇1min;③90%乙醇90s;④95%乙醇2min;⑤100%乙醇I5min;⑥100%乙醇II5min;⑦二甲苯I5min;⑧二甲苯Ⅱ5min;⑨中性树胶封片，晾干;20)在同等条件下，使用图像分析软件Image-ProPlus5.0分别测量每张切片AS斑块中巨噬细胞、MMP-9和α-SMA阳性表达面积占内膜总面积的百分比,半定量分析所有结果。2.3.5Westernblotting蛋白的提取1)组织蛋白的提取①取各组兔腹主动脉组织约30mg放置于EP管中，按10μl/mg加入RIPA和PMSF（R:P=100：1）混合液;②充分研磨后，冰上放置30min;③然后4°C离心，15000r/min，10min④取近中间层上清液200-300μl转入至另一新的1.5mlEP管中,—80°C冷冻保存备用。2)蛋白含量的测定严格按照BCA蛋白浓度测定试剂盒说明书检测各组组织蛋白浓度。2.3.6Westernblotting操作步骤1)SDS-聚丙稀酰胺凝胶的配制及上样①用双蒸水清洗干净玻璃板,放置好垂10 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察直电泳槽;②按照凝胶配制说明书配制凝胶,首先配制10%分离胶，轻微振荡混合均匀，注意胶高度低于玻璃板的2/3,其上加满双蒸水,压平除去气泡;③等到下层胶凝固后,除去上面多余的水分④配制5%的浓缩胶,在上层缓慢注满，置入梳子过程中注意避免气泡⑤待上层胶凝聚后，加入电泳液,小心拔出梳子,按顺序在孔内加蛋白Marker和待测蛋白样品;2)电泳先加电压80V,45min后,改电压为120V,蛋白跑到底部,关闭开关。3)转膜①提前把转膜液倒入转膜槽并放置在冰盒中预冷②与转膜夹大小适度的滤纸、海绵放入转膜液中湿润③切好的所需大小的PVDF膜，放入甲醇中分化④按照“黑胶白膜”原则即"夹子黑面-海绵一两层滤纸一凝胶一PVDF膜一两层滤纸一海绵-夹子白面"顺序放置凝胶，用玻璃棒排出里面的气泡，将夹子放入转膜槽中⑤电极膜正胶负;⑥设置恒流200mA,冰上转膜90min;4)封闭0.5%的脱脂奶粉封闭1.5h。5)洗膜1×TBST中洗膜10min×3次。6)一抗孵育将膜放入配制好的VCAM-1(1;350)和b-actin(1:3000)抗体中,4°C过夜。7)洗膜次日，1×TBST洗膜10min×3次。8)二抗孵育用5%脱脂奶粉稀释得到适度二抗。将膜放入二抗中，室温摇床孵育1h;9)洗膜1×TBST洗膜15min×3次。10)ECL增强化学发光显色①暗室中,将ECL化学发光试剂盒中的A和B两种试剂500μl等体积混合;②将PVDF膜面朝上放于保鲜膜上，滴加适量混合液，根据信号的强弱调整曝光时间，一般为30s到5min，待出现明显条带后，即刻终止曝光。11)生物凝胶电泳图像分析系统(Alphalmager2200)对图像进行扫描定量,计算各组蛋白表达的相对积分值作为蛋白的相对含量。每个样本的重复做3次,最后取均值。2.4统计学处理所有实验数据以均数±标准差(xs)表示。用SAS软件进行分析,多组间的均数比较用方差分析,两组间的均数比较用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。11 山东中医药大学2016届硕士学位论文3结果3.1心可舒对AS斑块的影响HE示：心可舒组、氟伐他汀组、高脂组内膜都存在斑块的形成，以高脂组动脉斑块最为明显,而心可舒组及氟伐他汀组的斑块增厚相对较小，对照组血管形态正常（图1）。3.2心可舒对AS斑块中巨噬细胞、MMP-9和α-SMA表达的影响氟伐他汀与心可舒组的巨噬细胞、MMP-9和α-SMA的表达明显低于高脂组的水平（P<0.01）（图1，表1）。图1巨噬细胞、MMP-9及α-SMA的免疫组化结果（×40）12 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察表1心可舒对巨噬细胞、MMP-9表达及α-SMA的影响(xs，n=8)groupmacrophageMMP-9α-SMAhigh-fat45.89±3.2944.07±3.0243.89±4.20***fluvastatin20.45±2.0727.39±3.3222.77±2.39***Xinkeshu26.66±3.2231.09±3.1123.58±2.67注：*P<0.01comparedwithhigh-fatgroup3.3心可舒对VCAM-1表达的影响氟伐他汀与心可舒组的VCAM-1相对表达水平分别为0.41±0.04和0.83±1.36，明显低于高脂组的1.15±0.10(P<0.01)（图2）。1.fluvastatingroup;2.Xinkeshugroup;3.high-fatgroup;4.controlgroup.图2各组AS斑块血管细胞黏附分子（VCAM-1）的表达13 山东中医药大学2016届硕士学位论文第二部分、临床研究1试验设计1.1试验设计类型:随机、平行、对照设计。1.2试验设计原则随机分组方法：随机平行分组方法病例来源及病例数：在研病例均来自2014.12-2015.12于山东省立医院中医科及心内科门诊，病例数60例，治疗组和对照组分别为30例。2病例选择2.1诊断标准2.1.1西医诊断标准1）按国际心脏病学会和协会及世界卫生组织临床命名标准化联合专题组报告《缺血性心脏病命名及诊断标准》制订。（见附录1）2）稳定型心绞痛分级诊断标准（根据加拿大心血管病学会（CCS）分级标准）。（见附录2）2.1.2中医症候诊断标准中医胸痹诊断标准及辩证标准参照卫生部2002年《中药新药临床研究指导原则》及国家中医药管理局医政司胸痹急症协作组《胸痹心痛急症诊疗规范》。1．胸痹的诊断标准（1）胸部闷痛，甚则胸痛彻背，喘息不得卧。（2）胸闷憋气、呼吸欠畅。（3）心电图检查显示缺血性改变。2．胸痹中医辨证标准（气滞血瘀证）主证：胸痛胸闷次证：胸胁胀满，心悸，面色少华或色黯，唇色暗舌脉象：舌质暗，或有瘀斑，脉涩。辨证时，主症具有其中之一，次要症状存在2项以上，且舌脉支持者，就可以诊断为本病。14 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察2.2心绞痛症状记分法表2（见附录3）2.3心绞痛症状病情分级标准轻度:心绞痛症状积分<15分。中度:心绞痛症状积分15~30分。重度:心绞痛症状积分>30分。2.4中医症状记分法参照2002年《中药新药治疗冠心病心绞痛的临床指导原则》制订。表3中医症状计分表主症0（分）3（分）6（分）9（分）每天发作很多次,十分发作的时候需要口服发作，经过休息可以缓影响正常生活(如穿胸痛无药物,症状缓解后可以解，不影响平常生活衣、饮食、散步、大便继续平常活动可以诱发病症发作)胸闷持续长，不能自己偶尔感到胸闷，可以自胸闷发作较频繁，但不胸闷无缓解，影响正常生活和己缓解影响正常生活工作次症0（分）2（分）4（分）6（分）偶尔出现,可以自己缓时有发生,不适感相对经常发生,持续难缓心悸无解明显解,影响生活常出现，胸胁胀满相对胸胁胀满无偶尔出现，休息后缓解胀满持续不能缓解明显面色无面色少华或色黯舌象正常唇舌紫暗脉象正常脉象涩2.5中医症状积分分级标准轻度:中医症状积分≤17分。中度:中医症状积分17-30分。重度:中医症状积分>30分。2.6纳入标准①患者符合中医胸痹诊断及气滞血瘀证辨证标准;②发作两次/周以上的患者;③心电图检査显示有缺血性变化或运动心电图显示阳性患者;④冠状CTA示血管固定狭窄率高于50%;15 山东中医药大学2016届硕士学位论文⑤年龄在40—80岁之间;⑥详细了解本研究，并自愿接受治疗者。2.7排除标准①不符合纳入病例标准者;②有心肌梗死病史或经检査证实为其他非心脏因素引起胸痛者;③合并严重高血压，心肺功能不全重度,:严重心律失常，肝、肾、造血系统等损伤严重的原发性疾病;④妊娠或哺乳期妇女;⑤过敏体质者;⑥不合作及精神病患者。3治疗方案3.1治疗方法对照组患者口服阿司匹林肠溶片75mg，每日一次，氯吡格雷50mg，每日一次。硝酸异山梨酯5-10mg/次，每日三次。酒石酸美托洛尔23.75-47.5mg，每日一次。伐他汀类10mg，每日一次,睡前服用。治疗组在对照组用药上加心可舒胶囊,一次四粒,每日三次,饭后30min服用，观察疗程4周。3.2观察指标(1)疗效性指标①心绞痛发作状况、硝酸甘油口服用药量。②中医证候变化。③心电图治疗前、后的变化。(2)安全性指标①一般体检指标。②血、尿、大便三大常规的化验检查。③肝、肾功能化验检查及不良反应。4疗效判定标准4.1心绞痛症状疗效判定标准据1979年全国中西医结合防治冠心病心绞痛、心律失常研究座谈会修订的《冠心病心绞痛及心电图疗效评定标准》制订。（见附录4）16 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察4.2心电图疗效判定标准据1979年全国中西医结合防治冠心病心绞痛、心律失常研究座谈会修订的《冠心病心绞痛及心电图疗效评定标准》制订。（见附录5）4.3中医证候疗效判定标准据积分法判定中医证候疗效：疗前积分疗后积分疗效指数(n)=×100%ٛ疗前积分ٛٛٛⅠ显效:n≥70%；Ⅱ有效:n≤30%<70%；Ⅲ无效:n<30%。5统计学处理所有数据均使用软件SPSS17.0对数据统计及分析，计算测量的资料采用xs（均数±标准差）形式来表示。数据处理是，等级资料采用秩和检验，计数资料采用2χ检验，计量资料采用t检验。P＞0.05则表示两组间无统计学意义，P＜0.05表示两组间有统计学意义，P＜0.01表示两组间有显著的统计学意义。6一般资料分析6.1两组基本资料比较表4两组基本资料比较（xs）指标治疗组对照组P值性别（男/女）14/1617/130.438年龄（岁）56.8±5.5559.1±5.800.117注：两组患者的性别经χ²检验P=0.438＞0.05无统计学意义，具有可比性；年龄经t检验，P=0.117＞0.05，无统计学意义，具有可比性。7研究结果7.1心绞痛疗效比较表5心绞痛疗效比较组别Ⅰ显效Ⅱ有效Ⅲ无效Ⅳ加重总有效量治疗组9165083.33%对照组51311160.00%注：两组总有效例数比较，经秩和检验，u﹦-2.014,,P=0.044<0.05，组间比较有统计学意义。17 山东中医药大学2016届硕士学位论文7.2心绞痛发作疗效比较经t检验，治疗组,治疗前后，发次次数比较，P＜0.01，有显著统计学意义；硝酸甘油片用量比较，P＜0.01，差异有显著统计学意义。经t检验，对照组，治疗前后，发作次数比较，P＜0.01，硝酸甘油片用量治疗前后比较，P＜0.01，有显著统计学意义。经t检验，治疗后，两组发作次数比较，P=0.031<0.05，有统计学意义；治疗组与对照组治疗后硝酸甘油片用量比较，P=0.017<0.05，有统计学意义（表6，图3）。表6心绞痛发作疗效比较（xs）发作次数（次/周）硝酸甘油片用量（片/周）组别n治疗前治疗后治疗前治疗后治疗组308.66±2.634.43±1.928.67±2.263.80±1.65对照组308.13±1.745.33±1.939.10±2.414.76±1.38图3，A两组治疗前后心绞痛发作次数比较；B两组治疗前后硝酸甘油片用量比较7.3心电图疗效比较表7两组治疗前后心电图疗效比较组别Ⅰ显效Ⅱ有效Ⅲ无效Ⅳ加重总有效率（%）治疗组11163090.00对照组6149166.67注:两组总有效例数比较，经秩和检验，u﹦-2.180,P=0.029<0.05，组间比较有统计学意义。7.4中医证候积分疗效比较表8中医证候积分疗效比较（xs）组别n治疗前治疗后P治疗组3021.03±2.377.20±2.970.000对照组3020.77±2.9711.27±3.520.000注:经t检验，治疗后两组患者中医证候积分均较治疗前明显降低,P<0.01,有显著统计学意义;经t检验，组间治疗后，治疗组与对照组比较,P=0.000<0.01,有显著统计学意义。18 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察7.5中医证候疗效比较表9两组患者治疗后中医证候疗效比较组别Ⅰ显效Ⅱ有效Ⅲ无效总有效率（%）治疗组1216293.33对照组715873.33注:两组经秩和检验，u﹦-2.017,P=0.044<0.05，组间比较有统计学意义。7.6安全性检测结果在此次研究中，对治疗、对照两组全部患者，行血、尿、大便三大常规及肝、肾功能等安全性指标检查，前后结果相比示治疗前后均无明显差异，且治疗过程中无严重不良事件发生。证明心可舒在应用过程中安全可靠，无毒副作用。19 山东中医药大学2016届硕士学位论文讨论1.中医学治疗冠心病心绞痛认识1.1病因病机认识本病的发生多和寒邪、饮食、情志、劳倦、体虚等病因侵犯心系，破坏其内在的阴阳平衡有关。病机：心脉痹阻。《素问·痹论》载:“心痹者,脉不通”。说明心血瘀阻是冠心病心绞痛的病机关键，“不通则痛”。《证治准绳》指出：“在络而不行者痛”亦证明了这一观点。在病机方面，两汉时期张仲景第一次在《金匮要略》中解释提到为“阳微阴弦”，意思是上焦的阳气因病邪的侵犯而衰少，下焦的阴寒贼邪有余，向上侵犯、占据胸部阳位，导致阴阳不平衡而发病。并且还指出，只存在单向过极，即仅有上焦阳虚或仅有下焦阴盛，都不会导致本病的发生。外界的寒性邪气可以遏制胸中阳气，造成心痛表象。如《医林改错·积块》曰：“寒气入经而稽迟，……故卒然而痛。”《济生方》云“心痛者，风冷气乘心也。”《素问·至真要大论》:“太阳之胜寒厥之胃，则内生心痛”均表明寒邪阻遏阳气，胸阳失展，导致心痛。《儒门事亲》曰：“酒食所伤，胸闷痞隔，酢心。”说明恣食肥甘酒食，饮食不节，损伤脾胃的运化生理功能，脾气不能正常转输水精，调节水液代谢失常，水液在体内停聚而产生水湿痰饮，抑遏心阳，气滞血瘀，致胸痹。宋·陈无己在《三因极一病症方论》言：“真心痛皆脏气不平，喜怒忧郁所致。”从精神调节方面出发，认为精神情志活动的失常会导致气机不畅，气机阻滞，血脉痹阻而心痛。劳倦容易损伤脾胃，脾的运化功能不足，不能把摄入的饮食物转化为精微物质，升清功能受损，也不能转输水谷精微于上焦、化生气血，气血生化不足，无法濡养心脉，导致疼痛的产生。年迈体虚，年过半百，气血运行迟缓，血脉容易瘀阻，且年老肾气自半，肾阴不足，而致心脉失于滋养而致胸痹。肾阳虚衰，君火失用，不能振奋心中的阳气，即心脉得不到肾阳的温煦，血脉容易发生运行不畅滞涩的状况，引发为胸痹。1.2本证病因病机认识胸痹的病症有虚实之分。虚证以气血阴阳虚损为表现，实证中以气滞、痰浊、血瘀、寒邪为表现。而实证中气滞血瘀最为多见。临床很多中医学者发现气血瘀滞在冠心病心绞痛病机发展中的起到重要作用。气与血在生理病理条件下相互依存、相互为用和相互资生，关系十分密切。一般认为气是血液的动力，可以促进血液在脉道里流动；血液是气的基础，可以承载气，有滋养、濡润的功能。严德馨教授认为气为百病20 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察之长,血为百病之本,千因百结,不离气血,故治疗的根本在气血。《沈氏尊生书》曰：“气运于血，血随气以周流，气凝血亦凝矣，气凝在何处，血亦凝在何处”。也体现了上述观点。《金匮要略》曰：“胸痹，心中痞气，气结在胸，胸满，胁下逆呛心。”所以，气机郁滞,血行不畅,日久则心脉瘀阻,痹阻心胸而引起疼痛。情志郁滞，易于伤肝，肝气的疏泄功能异常，气的运行受阻，也可郁久而化生火热，煎灼津液成痰浊，阻滞气机，还可侵犯脾胃，使其运化功能失常，生湿生痰，阻碍气机，清阳不展，遂发心痛。气虚也会导致气滞血瘀，明代张介宾《景岳全书》载：“气血不虚则不滞，虚则无有不滞。”气对血的推动无力而致血液运行不顺畅，瘀阻不行，心胸得到不到润养，则气机郁滞，发为胸痹。寒凝、痰湿、痰热、饮食积滞等均可使胸阳失展，气机不畅，心血瘀阻。所以，气滞血瘀是心绞痛发生的重要病机，为胸痹的基础临床证型。2心可舒胶囊药物组成及分析2.1方药组成：丹参、木香、三七、山楂、葛根2.2本方功效：活血化瘀，行气止痛。2.3本方方义：组方中丹参，味苦微寒，入心肝经，苦入心，色赤象火，专入血分，具有活血凉血、祛瘀止痛而不伤正气为君药，三七，味甘微苦温，阳明厥阴血分之药，止血散血定痛，有化瘀生新、化瘀不伤正的特点，木香，手少阳三焦药也，疗一切气滞，止诸般气逆，可调诸气,两者助君活血化瘀而不伤正，共为臣药，山楂，味酸甘微温，下积气，散滞血，葛根，味甘辛凉，解经气之壅遏，上行生津，止渴开肌，二者具为佐药，气血并治，重在理血，配伍得当，共奏活血化瘀、行气止痛之效。2.4方药分析丹参，苦微寒，入心、心包、肝经，又名：赤参（《别录》）、山参（《日华》）、蝉草（《本经》）。活血调经、祛瘀止痛。《本草述钩元》论曰：“丹参，皮丹肉紫，而味苦。为火之用药。据其奏效。似通利关脉一语足以概之。……盖此味水火之二气具足。”《药笼小品》载“功兼四物。谓其亦能补血。凡血虚有痰，大便不实者，碍于四物，而用之甚妙，兼补心血，天王补心丹用之是也。”《本草乘雅半偈》云：“苦，微寒，无毒。主寒热积聚，破症除瘕，止烦满，益气。”21 山东中医药大学2016届硕士学位论文木香，辛苦温，入脾胃、大肠、胆、三焦经，又名：蜜香（《别录》）、青木香（弘景）。行气止痛、健脾消食，《主治指掌》载：“调诸气不可无。”《本草易读》曰：“辛、苦、微温，无毒，性沉。手少阳三焦药也。疗一切气滞，止诸般气逆。九种心痛，积年冷气。调后重之痢泄，除反胃之呕逆。癖症块之结，癃淋胀痛之。治霍乱而疗温疟，除毒物而杀鬼物。”三七，甘微苦温，入肝胃经，又名：山漆（《纲目》）、金不换。化瘀止血、消肿定痛。《本草分经》云：“三七，甘苦微温，散瘀定痛，能损新血，治吐衄痈肿金疮杖疮，大抵阳明厥阴血分之药。”《外科全生集》载：“止血定痛，痈肿蛇伤。”《药笼小品》言：“广产者，细皮坚实，味甘苦，能生津补气。虚寒吐血，配入温滋剂中，宜炒用。”山楂，酸甘微温，入脾胃、肝经，又名：赤爪子《唐本》、山里果《食鉴》。消食健脾、行气散瘀。《药鉴》曰：“气平，味酸涩，带甘辛，无毒。利痰消食，下积气，散滞血。疗疝，止腹疼。专治肉积，能开脾健胃。又能治妇人儿枕疼痛，浓煎汁入砂糖少许立效。理脾用之，膨胀立消。……痘家用之，行气化痰，起胀解毒。又能破人参之滞气，痘家不得已用参，多以此监之。”《本草乘雅半偈》云：“酸苦甘，微寒，无毒。主疮，利小便，去痰热，止渴，令人少睡，有力，悦志。”葛根，甘辛凉，入脾胃经，又名：野葛《本经》、毒根《吴普》、胡蔓草《图经》、断肠草《纲目》。生津止渴、升阳止泻。《本草易读》言：“辛，甘，无毒。入足阳明经。解肌退热升阳散火，止呕除泻。”《长沙药解》载：“解经气之壅遏，清胃腑之燥热，达郁迫而止利，降冲逆而定喘。”《药笼小品》云：“能助胃气，上行生津，止渴开肌，发汗退热，为治清气下陷泄泻之圣药。……上盛下虚之人须斟酌用之。葛花解酒毒。”2.5现代药理研究丹参：主要为二萜醌、酚酸类化合物。①有研究表明，丹参素作用于Hcy升高模[3][4]型大鼠，可通过转硫途径降低血浆总同型半胱氨酸水平，达到减低血脂的效果。②丹参可以降低ET-1的水平，抑制ET-1缩血管作用，扩张血管、改善微循环。③丹[5]参可以使总胆固醇、血液粘度减低。④丹参具有抗血小板聚集，抑制血栓形成。[6]王新荣等认为，丹参酮ⅡA磺酸钠调控血栓素A2/前列腺素平衡，减低纤维蛋白原[7]血浆中水平，抑制血小板功能，防止血栓发生。欧希等报道，应用丹参注射液治疗22 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察肝硬化脾亢脾切除患者，结果表明丹参可血小板聚集，抑制血栓，改善高凝状态。木香，主要含挥发油、木香碱等物质。①动物实验表明，木香有效成分可以减低[8][9][10]胆固醇、甘油三酯水平。②具有扩张血管和降压作用。③侯鹏飞等采用水蒸气蒸馏法制取木香提取物成分作用于新西兰家，结果发现，木香挥发油等有效成分对ADP诱导的血小板聚集均具有显著的抑制作用(P<0.01)。④有利胆、促进胃动力和抗胃溃疡的作用。三七，主要以皂苷类成分和三七素为主，皂苷又包括人参皂苷、三七皂苷等。①[11]能够明显缩短凝血时间，促进血小板增加，加速止血。②降低血液粘度，抑制血小板聚集。③具有明显的造血作用。④能抗心肌缺血，保护心肌。⑤拮抗钙离子从而起[12]到扩张血管、降低血压的作用。⑥镇静、镇痛⑦减轻肝组织损伤，起到保肝作用。[13]山楂，主含有黄酮类、黄烷及其聚合物等，①能够降低血脂②保肝③可以通过显[14]著扩张外周血管起到缓慢且持久降低血压的作用④能增加心肌收缩力、降低心率，使冠脉血量量增加，心肌耗氧减少，改善心肌功能。⑤抗氧化作用⑥能双向调节肠道功能，促进肠道蠕动。葛根，主要有葛根素、大豆苷元和大豆苷等异黄酮类等。①能扩张血管，降低血[15]压、心率，较少心肌耗氧量。②能降低血脂，起到抗动脉粥样硬化作用。③能改善[16]因氯化钙等诱发的心律失常④抗血小板聚集，抑制血栓形成，改善微循环⑤改善肝肾功能⑥可清除超氧阴离子自由基和二苯基苦基苯肼等氧化物，起到抗氧化作用。⑦[17]可有效降低血糖3西医稳定型心绞痛的认识稳定型心绞痛（stableanginapectoeis,SAP）主要是在冠状动脉存在固定性狭窄或部分闭塞的基础上，因心肌负荷增高发生冠脉血流量不能满足心肌代谢需要，而引起心肌急剧的、暂时的缺血、缺氧的临床综合征。其发作程度、频率、性质及诱因[18]在几周内没有明显变化，其发生的基础在于动脉粥样硬化。动脉粥样硬化的发生机制十分复杂，有许多种从不同角度认识的假说如，脂源性学说、致突变学说、受体缺失学说、血小板聚集和血栓形成学说、单克隆学说、损伤反应学说等其他学说。最近多数学者支持“内皮损伤反应学说”。一般情况下内皮细胞具有抵御炎性细胞浸润的作用,但是当自身受到有害因子扰乱、刺激时,导致内皮细23 山东中医药大学2016届硕士学位论文胞功能紊乱，内膜下脂质积聚，会反应性产生过多的内皮黏附分子和化学诱导分子，黏附分子如血管粘附因子-1(VCAM-1)、E-选择素、P-选择素等。这些黏附分子和诱导因子又促进单核细胞和T淋巴细胞黏附、迁移、聚集于功能紊乱的内皮下。巨噬细胞募集过程中吞噬大量脂质,形成泡沫细胞。肉眼下，可见动脉表面黄色变色区—脂纹。斑块进一步发展，巨噬细胞产生释放大量趋化因子、生长因子等细胞因子,促进[19]平滑肌细胞的迁移和增值,泡沫细胞也释放大量的血小板源性生长因子和生长因子，进一步刺激平滑肌增殖及基质蛋白的合成，形成粥样斑块。在晚期,存在大量的细胞凋亡，可降低斑块稳定性。在细胞外基质中，基质的沉积经依赖部分由基质金属蛋白酶（MMP）介导的平滑肌细胞合成和降解维持平衡状态。单核/巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶(MMP),MMP-9可选择性的降解细胞外基质成分,减弱AS斑块稳定型,促进斑块的破裂，导致不良事件的发生。4结果分析4.1实验结果分析4.1.1.心可舒对AS斑块的影响HE示：心可舒组、氟伐他汀组、高脂组内膜都存在斑块的形成，以高脂组动脉斑块最为明显,而心可舒组及氟伐他汀组的斑块增厚相对较小，对照组血管形态正常。4.1.2心可舒对VCAM-1表达的影响本研究发现氟伐他汀及心可舒可明显减少血管VCAM-1的表达(P<0.01)，提示心可舒及氟伐他汀可通过抑制VCAM-1的表达起到保护内皮细胞功能及抗AS作用。4.1.3心可舒对AS斑块中巨噬细胞、MMP-9和α-SMA表达的影响本研究发现心可舒与氟伐他汀治疗后,AS斑块的巨噬细胞炎症浸润、平滑肌的增殖和迁移明显低于高脂组的水平(P<0.01),发现MMP-9蛋白的表达也明显减少(P<0.01)，提示心可舒治疗后明显抑制了斑块的炎症反应及MMP-9蛋白的表达,表明心可舒有类似他汀类药物的作用，通过抑制炎症及MMP-9蛋白的表达具有一定的稳定AS斑块的作用。4.2临床结果分析4.2.1治疗组与对照组心绞痛疗效比较两组总有效率分别为83.33%、60.00%，P=0.044<0.05，有统计学意义，治疗组优于对照组。24 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察4.2.2治疗组与对照组心绞痛发作疗效比较两组治疗后发作次数比较，P=0.031<0.05，有统计学意义，说明在减少心绞痛发作次数上，治疗组优于对照组；治疗后硝酸甘油片用量比较，P=0.017<0.05，有统计学意义，说明治疗组在减少硝酸甘油用量上优于对照组。4.2.3治疗组与对照组心电图疗效比较两组总有效率分别为90.00%、66.67%，P=0.029<0.05，有统计学意义，说明治疗组在改善患者心电图方面优于对照组。4.2.4治疗组与对照组中医证候积分疗效比较经t检验，中医证候积分疗效组间治疗后，治疗组与对照组比较,P=0.000<0.01,有显著统计学意义，说明治疗组优于对照组。4.2.5治疗组与对照组中医证候疗效比较两组总有效率分别为93.33%、73.33%，P=0.044<0.05，有统计学意义，说明治疗组在改善中医症候体征方面优于对照组。由于受经费、时间和客观条件的限制，本课题尚存不足之处，其远期疗效尚有很大研究空间，还有待大样本临床研究验证，对于其抗动脉粥样硬化的机制也只是进行初步的探讨，有待于进一步深入研究。25 山东中医药大学2016届硕士学位论文结语经过动物实验和一年的临床观察，探讨了气滞血瘀型稳定型心绞痛的发病机理及活血化瘀、行气止痛法对其的临床疗效。结果表明：临床研究，心可舒胶囊可明显改善临床症状，改善心电图指标，而且安全、副作用小；实验研究，心可舒还可以减少VCAM-1、巨噬细胞、MMP-9和α-SMA表达，进而减轻炎症对血管内皮细胞的损伤，抗动脉粥样硬化。从而证明心可舒可以预先防治动脉粥样硬化，减低心血管疾病的发生率，对于临床有十分重要的意义。26 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察参考文献[1]高润霖．遵循指南规范慢性稳定性心绞痛的诊断和治疗[J].中华心血管病杂志，2007，35（3）：193-206.[2]温玉平，周泽英，徐春梅等.冠心病中医临床分型与辨证施治浅谈[J].时珍国医国药杂志，2006,17(II):2336-2337.[3]CaoYG,ChaiJG,ChenYC,etal.Beneficialeffectsofdanshensu,anactivecomponentofSalviamiltiorrhiza,onhomocysteinemetabolismviathetrans-sulphurationpathwayinrats[J].BritishJPharmacol,2009,157(3):482-490.[4]ChenY,CaoY,ZhouJ,etal.Mechanism-basedpharmacokinetic-pharmacodynamicmodelingofbidirectionaleffectofdanshensuonplasmahomocysteineinrats[J].PharmRes,2009,26(8):1863-1873.[5]洪馨,安穗卿,王宁生.复方丹参滴丸中丹参素的药物动力学研究[J].中药新药与临床药理,2000,11(5)：286.[6]王新荣，赵苏.丹参酮ⅡA磺酸钠对肺心病患者血流变及血脂的影响[J].中国生化药物杂志，2011，32（3）：237.[7]欧希，刘吉奎，熊沛等.丹参注射液对肝硬化脾亢脾切除术血液流变性的影响[J].实用医学杂志，2011，27（18）：3416.[8]UpadhyayOP,OjhaJK,BajpaiHS.Experimentalstudyonhypolipidaemicactivityofkustha(SaussurealappaClarke)[J].JResAyurvedaSiddha,1994,15:52-63.[9]王本祥.现代中药药理学[M].天津:天津科学技术出版社,1997.[10]侯鹏飞,陈文星,赵新慧等.木香挥发性成分气质联用分析及其抑制血小板聚集作用的研究[J].中国实验方剂学杂志,2008,14(7):26-30.[11]蔡燕玲，黎罕文，扬晓明.三七的药理研究进展[J].陕西中医学院学报，2001，24（5）：57.[12]黄震宇，王文健，陈响中.三七用于冠心病治疗的药理研究[J].时珍国药研究，1997，8（1）：17.27 山东中医药大学2016届硕士学位论文[13]刘庆生，王小奇，来立群等.三七对酒精性肝病大鼠肝组织学和TNF-a影响[J].中华中医药学刊,2008，26（2）：317-320.[14]黄凯，杨新波，黄正明．金丝桃苷药理作用研究进展[J]．药学进展，2009，28(8):1046－1048.[15]张东华，董强波，彭曙光.葛根的化学成分、药理作用和临床应用研究[J]．首都医药药物研究.2007.4:44-46.[16]WuK,LiangT,DuanX,etal.Anti-diabeticeffectsofpuerarin,isolatedfromPuerarialobata(Willd.),onstreptozotocin-diabetogenicmicethroughpromotinginsulinexpressionandamelioratingmetabolicfunction[J].FoodChemToxicol,2013,60(1):341-347.[17]WuK,LiangT,DuanX,etal.Anti-diabeticeffectsofpuerarin,isolatedfromPuerarialobata(Willd.),onstreptozotocin-diabetogenicmicethroughpromotinginsulinexpressionandamelioratingmetabolicfunction[J].FoodChemToxicol,2013,60(1):341-347.[18]高润霖．遵循指南规范慢性稳定性心绞痛的诊断和治疗[J].中华心血管病杂志，2007，35（3）：193-206.[19]SHAHPK.Mechanismsofplaquevulnerabilityandrupture.JAmCollCardiol,2003,41(4Suppl):15s一22s.28 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察综述冠心病心绞痛在中西医学的认识一、祖国医学对于冠心病心绞痛的认识1病名冠心病稳定型心绞痛，这一名词，在我国古代医学典籍中很难查到，根据它的发病特点，可近似归到“心痛、胸痹”类别中。最早可以在《山海经》中见到“心痛”。也可以在现存最早的古医籍《五十二病方》中查到关于“心痛”的记录。《难经》也有记载。“胸痹”一词要追溯到《黄帝内经》，曰：“善病胸痹喉痹逆气”。而胸痹的正式出现，是到了两汉时期，由张仲景在《金匮要略》提出。2病因病机2002年修订的《中药新药临床研究指导原则》中将冠心病心绞痛分为心血瘀阻型、气虚血瘀型、痰阻心脉型、气滞血瘀型、阴寒凝滞型、心肾阴虚型、气阴两虚型、[1]阳气虚衰型八个证型。温玉平等将胸痹分为气滞血瘀型、胸阳痹阻型、气郁化火型、气虚血瘀型、阳虚血瘀型、气阴两虚型、阳气虚损型和阳虚欲脱型。无论从哪种分型,[2]都可以看出当代中医随着对胸痹的认识逐渐深入,分型也逐渐详细。李杨帆等对临床166名患者做证型分析得出，血瘀是最多见的证型。在病机方面，两汉时期张仲景第一次在《金匮要略》中解释提到为“阳微阴弦”，意思是上焦的阳气因病邪的侵犯而衰少，下焦的阴寒贼邪有余，向上侵犯、占据胸部阳位，导致阴阳不平衡而发病。并且还指出，只存在单向过极，即仅有上焦阳虚或仅有下焦阴盛，都不会导致本病的发生。外界的寒性邪气可以遏制胸中阳气，造成心痛表象。如《医林改错·积块》曰：“寒气入经而稽迟，……故卒然而痛。”表明寒邪阻遏阳气，胸阳失展，导致心痛。[3][4]姜宁等认为冠心病心绞痛与三焦气化失司有重要关系。高勃认为肾虚导致冠心病心绞痛发生的主要原因。年迈体虚，年过半百，气血运行迟缓，血脉容易瘀阻，且年老肾气自半，肾阴不足，而致心脉失于滋养而致胸痹。3治疗的认识两千多年前，古人已经冠心病心绞痛的治疗，提出了很好的见解。两汉时期的著名医学家张仲景在《金医要略》，指出该病具有缓急的两种情况，辩证求因后，认为病机为“阳微阴弦”，以辛温通阳作为该病的治疗原则，拟定主方瓜蒌薤白白酒汤，29 山东中医药大学2016届硕士学位论文痰饮壅盛证治以瓜蒌薤白半夏汤，气机郁滞证治以枳实薤白桂枝汤、人参汤，轻者治以橘皮枳实生姜汤，急症治以薏苡附子散。唐宋时期医家，在其的基础上加用了辛香通散、化浊开窍法的一些药物。例如《太平圣惠方》提及木香、草豆蔻、吴茱萸等药物。亦强调针灸等外治疗法对胸痹的重要性。明清时期对该病又有了崭新的认识，提出新的治法活血化瘀法，代表方剂如丹参饮《时方歌括》，血府逐瘀汤《医林改错》。[5]近代的治疗，可以从两方面论述。①补虚，张国琪认为胸痹的病机主要在于心气虚,气滞、痰浊、血瘀是其中重要的标证。所以在对胸痹的治疗过程中,提出自己的观点，认为行气活血化瘀法只能治疗一时的标证,并不能的除去该病的根源,在治疗中应用补益心气法才能彻底治疗胸痹。因此,张老强调在临床治疗中,要辨证论治并结合补益心气、心阳等法,同时进行活血化瘀,才能真正起到治疗的效果。在张老方子中经常见到黄芪、党参、人参等补气药物,另外加用红花、桃仁等活血化瘀药取得理想疗[6]效，就是其理论最好的印证。张珍玉教授在经常以养心益气、活血通络为治则治疗胸痹,组方为当归、丹参、人参、五味子、生地黄、远志、瓜蒌皮、桔梗、延胡索、[7]砂仁、甘草，患者症状明显缓解。严少勤发现在常规西药的基础上加用补阳还五汤[8]对气虚血瘀型冠心病心绞痛患者中,治疗组比对照组有效(P<0.05)。邵念方教授[9]强调调理脾胃在治疗胸痹中的作用，自创补气饮。邝开安用右归丸从肾治疗胸痹，[10]患者症状明显改善。覃裕旺等研究发现养心通脉方治疗气阴两虚挟血瘀型冠心病心绞痛，观察组有效率为89.7％，对照组有效率为76.9％，两组有效率比较有显著[11]性差异（P<0.05）。李成林等在常规西药治疗基础上加用益气活血通络方（扶芳藤30g、人参10g、三七10g、石菖蒲8g等组成），治疗82例气虚血瘀型冠心病心绞痛患者,结果表明，治疗组在改善hs-CRP、IL-1β含量方面均优于对照组(P<0.01)。[12]秦敬品观察温阳活血疗法治疗冠心病心绞痛患者179例发现,治疗组总有效率为94.4%，对照组有效率为78.7%，在心绞痛症状及心电图疗效方面明显高于对照组。[13]②泄实，周津等观察血府逐瘀汤合丹参饮化裁治疗心血瘀阻型冠心病患者100例,发现观察组治疗前后GRACE评分、CRP及硝酸甘油用量较对照组疗效更好。[14]金志刚观察银丹心脑通胶囊治疗气滞血瘀型患者，发现银丹心脑通胶囊具有增加心[15]肌血流量的作用。李树斌临床观察发现服用瓜蒌薤白白酒汤加味的治疗组总有效率[16]明显优于对照组，并且患者TG、TC、LDL下降幅度优于对照组（P<0.05）。刘远婷观察小陷胸汤合丹参饮治疗冠心病心绞痛30例,发现中药治疗组比西药的总有效率30 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察[17][18]高，差异显著。赵淳教授善用辛昧通络、活血化瘀法治疗胸痹。刘兴奎等以自拟逐瘀化痰汤(川芎、丹参、赤芍、当归、地龙、瓜蒌、菖蒲、陈皮、茯苓、三七、郁金、莱菔子、元胡、黄芪、柴胡)治疗冠心病稳定型心绞痛痰瘀痹阻证40例,患者临床症状明显缓解,并且可发现逐瘀化痰汤可以降低纤维蛋白原。参附注射液被证明可以改善稳定型心绞痛症状，改善微循环可能是其机制；有实验证明川芎嗪注射液与低分子肝素合用治疗稳定型心绞痛,减少了稳定型心绞痛血栓形成，有效缓解冠脉痉挛，疗效理想，不良反应少。二、现代医学对冠心病的心绞痛的认识1定义冠状动脉粥样硬化性心脏病指冠状动脉（冠脉）发生的粥样硬化致使血管腔变狭窄或被堵塞，因而导致的心肌缺血、缺氧或坏死而引起的心脏病。各种动脉硬化共有的特点是动脉管壁逐渐增厚变硬、失去原有的弹性和管腔变窄缩小。2西医发病机制冠状动脉粥样硬化性心脏病其发生的基础在于冠状动脉动脉粥样硬化。动脉粥样硬化的发生机制十分复杂，有许多种从不同角度认识的假说有，脂源性学说、致突变学说、受体缺失学说、血小板聚集和血栓形成学说、单克隆学说、损伤反应学说等其他学说。最近多数学者支持“内皮损伤反应学说”。一般情况下内皮细胞具有抵御炎性细胞浸润的作用,但是当自身受到有害因子扰乱、刺激时,导致内皮细胞功能紊乱，内膜下脂质积聚，会反应性产生过多的内皮黏附分子和化学诱导分子，黏附分子如血管粘附因子-1(VCAM-1)、E-选择素、P-选择素等。这些黏附分子和诱导因子又促进单核细胞和T淋巴细胞黏附、迁移、聚集于功能紊乱的内皮下。巨噬细胞募集过程中吞噬大量脂质,形成泡沫细胞。肉眼下，可见动脉表面黄色变色区—脂纹。斑块进一步发展，巨噬细胞产生释放大量趋化因子、生长因子等细胞因子,促进平滑肌细胞的迁移和增值,泡沫细胞也释放大量的血小板源性生长因子和生长因子，进一步刺激平滑肌增殖及基质蛋白的合成，形成粥样斑块。在晚期,存在大量的细胞凋亡，可降低斑块稳定性。在细胞外基质中，基质的沉积经依赖部分由基质金属蛋白酶（MMP）介导的平滑肌细胞合成和降解维持平衡状态。单核/巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶(MMP),MMP-9可选择性的降解细胞外基质成分,减弱AS斑块稳定型,促进斑块的破裂，导致不良事件的发生。31 山东中医药大学2016届硕士学位论文3西医的治疗1调脂治疗JUPITER研究中，选取LDL-C<130mg/dl且hs-CRP≥2mg/dl的患者，用瑞舒伐他汀对他们治疗，发现瑞舒伐他汀可以明显降低患者主要心血管事件发生率。阿托伐他汀TNT研究eGFR最新结果第一次证明改善肾功能和降低心血管事件之间存在十分明显的相关性，无论肾功能的基线情况如何，eGFR的改善与MCVE降低具有高度剂量相关性。SEARCH试验观察到让心肌梗死患者口服辛伐他汀80mg/d，并不会比20mg/d治疗效果好，不能减少心血管事件的不良发生率，但却显著增加肌病的风险。多项临床研究表明PCSK9抑制剂具有明显降低胆固醇的作用，早期预防治疗心血[19]管疾病。与他汀类药物依折麦布将形成三大降脂药格局。2抗凝治疗ISAR-REACT3临床研究选取4570名拟行PCI的肌钙蛋白阴性的冠心病患者，把他们随机分为两组，分别用比伐卢定和普通肝素用作PCI辅助抗凝药物。结果显示：比伐卢定比普通肝素更能有效降低PCI患者出血的发生率。3抗血小板治疗DISPERSE2研究发现，血小板p2y12受体拮抗剂AZD6140抑制血小板作用比氯吡格雷效果显著，呈剂量依赖性，并且在预防心梗发生率和出血风险上有一定优势。新型抗血小板药-PAR-1受体拮抗剂临床研究目前有vorapaxar和atopaxar两种[20],通过阻断凝血酶介导的血小板活化，抑制血小板激活和聚集。Ⅲ期临床试验TRA[21]2P-TIMI50随机将26449例近两周到一年发生血管事件的患者分为vorapaxar和对照组，结果显示vorapaxar可以降低复合终点的发生率，但会增加大出血的发生率。[22]On-TIME2试验观察高剂量的替罗非斑治疗STEMI患者，结果发现，替罗非班组患者PCI术后1小时ST段回落大于3mm者的比例明显高于对照组P<0.05，并且还发现术后30天不良事件的发生率也比对照组低P>0.05。4.介入治疗稳定型心绞痛患者进行介入术治疗，可以明显改善整体预后，取得较好血管重建[23]疗效。且大量临床研究证明，对于伴随多支血管病变者，介入术治疗风险与其他治[24]疗方法相比较低。32 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察[25]ParkSJ等选取2240例左主干病变患者，1102例患者行支架置入术，1138例行CABG术，随访3年，发现，支架置入组死亡率与CABG组没有明显差异P>0.05，但是在靶血管再次血管重建率方面，支架置入组要明显高于CABG组P<0.01，说明支架置入治疗左主干病变，是长期有效的、安全的。参考文献[1]温玉平，周泽英，徐春梅等.冠心病中医临床分型与辨证施治浅谈[J].时珍国医国药杂志，2006,17(II):2336-2337.[2]李杨帆，齐昉，刘红旭，不稳定心绞痛患者不同中医证候的血浆FIB水平回顾性分析[J]．首都医科大学学报，2008，29(2)：26-28.[3]姜婷，迟伟峰，于广宇等．从三焦气化失司论冠心病心绞痛的中医病机［Ｊ］．中医学报，2015，30（5）：684－686.[4]高勃，张明雪.从肾脏论治冠心病[J].辽宁中医药大学学报，2012,14（10）：29-31.[5]徐惠梅.国医大师张琪教授诊疗冠心病遣方用药思路及验案举例[C].中华中医学会心病分会第十一届学术年会论文集，浙江杭州:中华中医药学会心病分会，2009.[6]王小平.张珍玉致胸痹验案[J].山东中医杂志.2002，21（7):434-435.[7]严少勤.补阳还五汤联合西药治疗气虚血瘀型冠心病心绞痛的临床观察[J].中国医药指南,2012,10(10):271-272.[8]部帅，桑素珍.邵念方辨治胸痹学术思想简析[J].山西中医杂志，2009(10).[9]邝开安.右归丸为主方治疗冠心病心绞痛40例[J].陕西中医,2005,26(7):632-633.[10]覃裕旺，朱智德，卢健棋等.养心通脉方治疗气阴两虚挟血瘀型冠心病心绞痛临床研究[J].中医学报，2015，30（3）：428-429，432.[11]李成林，卢健棋，潘朝锌等.益气活血通络方治疗冠心病疗效及对血管内皮功能和免疫调节的影响[J].广州中医药大学学报,2015,2(32):208-211.[12]秦敬品.温阳活血疗法治疗冠心病心绞痛疗效分析[J].中西医结合心血管病杂志，2015,3（23）:110-111.33 山东中医药大学2016届硕士学位论文[13]周津，丛洪良，陈慧玲.血府逐瘀汤合丹参饮化裁治疗心血瘀阻型冠心病疗效分析［J］.中药材，2014，9(37):1705-1707.[14]金志刚.银丹心脑通软胶囊治疗气滞血瘀型冠心病60例[J].中西医结合心脑血管病杂志,2008,6(9):4.[15]李树斌.瓜蒌薤白白酒汤加味治疗冠心病心绞痛疗效观察[J].中西医结合心血管病杂志，2015,3（24）:134-135.[16]刘远婷.小陷胸汤合丹参饮治疗冠心病心绞痛30例临床观察[J].江苏中医药，2012，44（9）：34-35.[17]黄明霞.赵淳教授辨治冠心病经验[J].云南中医中药杂志，2002,23(6):6-7.[18]刘兴奎，吴华慧，孟国玮等.自拟逐瘀化痰汤治疗冠心病稳定型心绞痛的临床观察[J].中国医药指南，2012,10（6）:227-228.[19]ShimadaYJ,CannonCP.PCSK9(Proproteinconvertasesubtilisin/kexintype9)inhibitors:past,present,andthefuture[J].2015,36(36):2415-2424.[20]ChatterjeeS,SharmaA,MukherjeeD.PAR-1antagonists:currentstateofevidence[J].JThrombThtombol,2013,35:1-9.[21]SciriticaBM,BonscaMP,BraunwaldE,etal.Vorapaxarforsecondarypreventionofthromboticeventsforpatientswithpreviousmyocardialinfarction:aprespecifiedsubgroupanalysisoftheTRA2°P-TIMI50trial[J].Lancet.2012,380:1317-1324.[22]Van'tHofAW,TenBergJ,HeestermansT,etal.OngoingTirofibanInMyocardialinfarctionEvaluation(On-TIME)2studygroup.PrehospitalinitiationoftirofibaninpatientswithST-elevationmyocardialinfarctionundergoingprimaryangioplasty(On-TIME2):amulticentre,double-blind,randomisedcontrolledtrial[J].Lancet,2008,372(9638):537-546.[23]MukherjeeD.ACPJournalClub.Review:enoxaparinduringPCIisbetterthanunfractionatedheparinforreducingmortalityincoronaryheartdisease[J].AnnInternMed，2012,156（10）：JC5-2.[24]DanielsDV,van'tVeerM,PijlsNH，elal.Theimpactofdownstream34 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察coronarystenosesonfractionalflowreserveassessmentofintermediateleftmaindisease[J].JACCCardiovascInterv,2012,5(10):1021-1025.[25]SeungKB,ParkDW,KimYH,etal.Stentsversuscoronary-arterybypassgraftingforleftmaincoronaryarterydisease[J].NEnglJMed,2008,358:1781-1792.35 山东中医药大学2016届硕士学位论文附录附录1按国际心脏病学会和协会及世界卫生组织临床命名标准化联合专题组报告《缺血性心脏病命名及诊断标准》制订。(1)劳累性心绞痛劳累性心绞痛的特征是由于运动或其他增加心肌需氧量的情况所诱发的短暂胸痛发作,休息或舌下含服硝酸甘油后,疼痛常可迅速消失。其可分为3类:①初发型劳累性心绞痛:病程在1个月以内。②稳定型劳累性心绞痛:病程稳定1个月以上。③恶化型劳累性心绞痛:同等程度劳累所诱发的胸痛发作次数、严重程度及持续时间突然加重。(2)自发性心绞痛自发性心绞痛的特征是胸痛发作与心肌需氧量的增加无明显关系。与劳累性心绞痛相比,这种疼痛一般持续时间较长、程度较重、且不易为摘酸甘油缓解。未见酶变化,心电图常出现某些暂时性的S-T段压低或T波改变。自发性心绞痛可单独发生或与劳累性心绞痛合并存在。自发性心绞痛患者的疼痛发作频率、持续时间及疼痛程度可有不同的临床表现,有时患者可有持续较长的胸痛发作,类似心肌梗死,但没有心电图及酶的特征性变化。某些自发性心绞痛患者在发作时出现暂时性的S-T段抬高,常称为变异型心绞痛。但在心肌梗死早期记录到这一心电图图型时,不能应用这一名称。初发型劳累性心绞痛、恶化型劳累性心绞痛及自发性心绞痛常统称为“不稳定性心绞痛”。附录2稳定型心绞痛分级诊断标准（根据加拿大心血管病学会（CCS）分级标准）：Ⅰ级：一般体力活动不引起心绞痛，例如上楼或行走，但紧张、快速或持续用力可引起心绞痛的发作；Ⅱ级：日常体力活动稍受限制，上楼、登高、饭后行走或快步行走情绪激动或寒36 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察冷或风中行走、情绪激动可引起心绞痛发作或者仅在睡醒后数小时内发作。在正常情况下以一般速度平地步行200m以上或登一层以上的楼梯体力受限。Ⅲ级：日常体力活动明显受限，在正常情况下以一般速度平地步行100-200m或登一层楼梯时可发作心绞痛；Ⅳ级：轻微活动或休息时即可出现心绞痛症状。附录3表2心绞痛症状记分表主症0（分）3（分）6（分）9（分）发作时经休息即缓解，发作时需药物治疗,缓发作频繁,影响疼痛程度无不影响日常生活解可继续正常活动日常生活每日至少发作4发作次数无每周发作2-3次每日至少发作1-3次次以上每次疼痛的持续时间在每次疼痛持续在6至10每次疼痛持续超持续时间无5分钟以内分钟之间过10分钟进食、饱餐、活动后易诱发因素无运动剧烈诱发无诱因诱发每周服10片以硝酸甘油用量无每周服1-4片每周服5-9片上附录4据1979年全国中西医结合防治冠心病心绞痛、心律失常研究座谈会修订的《冠心病心绞痛及心电图疗效评定标准》。A轻度显效:症状消失或基本消失。有效:疼痛发作次数、程度及持续时间有明显减轻。无效:症状基本与治疗前相同。加重:疼痛发作次数、程度及持续时间有所加重(或达到“B中度”、“C重度”标准)。B中度显效:症状消失或基本消失。有效:症状减轻到“A轻度”的标准。无效:症状基本与治疗前相同。加重:疼痛发作次数、程度及持续时间都有所加重(或达到“C重度”的标准)。C重度显效:症状基本消失或减轻到“A轻度”的标准。有效:症状减轻到“B中度”的标准。37 山东中医药大学2016届硕士学位论文无效:症状与治疗前相同。加重:疼痛发作次数、程度及持续时间都有所加重。附录5据1979年全国中西医结合防治冠心病心绞痛、心律失常研究座谈会修订的《冠心病心绞痛及心电图疗效评定标准Ⅰ显效:心电图恢复至“大致正常”或达到“正常心电图”。Ⅱ有效:原降低的ST段,较治疗后升高0.05mV以上,但没有正常水平,在主要导联倒置T波变浅(高于25%以上者),或T波由平坦变为直立者。Ⅲ无效:治疗前后心电图大致相同。Ⅳ加重:ST段经治疗降低达0.05mV以上,主要导联倒置T波加深(高于25%以上),或直立T波变平坦,平坦T波变倒置,可见异位心律、房室或室内传导阻滞。38 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察致谢感谢我的导师牟林茂教授和董波教授对我的悉心指导和无私的关怀，时光匆匆，在两年的跟随老师学习生活中，感受到导师治学的严谨、知识的渊博及崇高的敬业精神，无时无刻都在感染、激励我向前奋进。在此我向我的导师致以崇高的敬意和衷心的感谢！感谢在山东省立医院转科期间每位老师给予我的细心的指导和关心，感谢师姐徐飞飞、徐慧、陈兴娟、王莹，师兄曹新冉、李俊龙在课题中对我的帮助和生活中对我的鼓励。感谢教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室黄山英老师无私的帮助和实验室其他同学的协助。感谢我的父母和所有关心帮助我的人！最后，真挚地感谢答辩委员会和参加论文评阅的专家为论文做的指导和帮助！39 山东中医药大学2016届硕士学位论文发表论文40 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察41 山东中医药大学2016届硕士学位论文42 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察43 山东中医药大学2016届硕士学位论文44 心可舒治疗冠心病稳定型心绞痛（气滞血瘀证）的实验研究及临床观察45
